利用牡蛎制备DPP-IV抑制肽及其活性分析

• 作者: 陈宏 章骞 陈玉磊 翁凌 张凌晶 谢少浩 刘光明 曹敏杰
• 来源期刊: 食品科学
• 关键词: 牡蛎 二肽基肽酶-IV抑制肽 分离纯化 抑制活性 分子对接
• 年，卷（期）: 2021,（10）
• 所属期刊栏目: 生物工程|Bioengineering
• 页码范围: 120-126
• 页数: 7页
• 分类号: TS254.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-20200226-294

摘要

以牡蛎肉为原料制备二肽基肽酶-IV(dipeptidyl peptidase-IV,DPP-IV,EC 3.4.14.5)抑制肽.通过对比5种蛋白酶(木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、胰酶、中性蛋白酶和复合蛋白酶)制备的酶解液对DPP-IV的抑制活性,发现胰酶制备的酶解液对DPP-IV抑制效果最好.通过优化胰酶酶解条件,确定最优酶解条件为加酶量0.8％、pH?8.0、温度37?℃,酶解时间90 min.酶解液经超滤、Sephadex?G-15和高效液相色谱分离纯化,获得肽片段.通过质谱鉴定筛选得到2种肽段的序列为Glu-Ile-Thr-Ala-Leu-Ala-Pro-Ser-Thr-Met-Lys(EITALAPSTMK)和Ile-Leu-Ala-Pro-Pro-Glu-Arg(ILAPPER).利用BIOPEP在线模拟分析了这2个肽的胃肠液消化特性.采用固相合成法合成肽段APSTM和ILAPPER,并应用于DPP-IV抑制活性研究.结果显示,2个肽段的IC50值分别为354.81μmol/L和16.98μmol/L.分子对接结果表明,抑制肽与DPP-IV的活性部位主要以氢键、范德华力和π键相互作用为主.本研究通过酶解牡蛎肉制备高抑制活性的DPP-IV抑制肽,为以牡蛎为原料的功能性食品开发利用提供了理论基础.