芩连润肺汤的HPLC指纹图谱建立、含量测定及多元统计分析

• 作者: 闫凯莉 尹程程 刘梦瑶 崔长升 汪莹 孙晓舟 孙丽平 齐滨 刘莉
• 来源期刊: 中国药房
• 关键词: 芩连润肺汤 高效液相色谱法 指纹图谱 含量测定 聚类分析 正交偏最小二乘判别法
• 年，卷（期）: 2021,（16）
• 所属期刊栏目: 药学研究
• 页码范围: 1956-1963
• 页数: 8页
• 分类号: R284.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.6039/j.issn.1001-0408.2021.16.07

摘要

目的:建立芩连润肺汤的指纹图谱,测定其中11种成分的含量,并进行聚类分析、正交偏最小二乘判别法(OPLS-DA)分析.方法:采用高效液相色谱法(HPLC).色谱柱为ZORBAX Eclipse Plus C18,流动相为乙腈-0.05％磷酸溶液(梯度洗脱),检测波长为260 nm,柱温为30℃,流速为1.0 mL/min,进样量为10μL.以汉黄芩苷为参照,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》绘制10批芩连润肺汤的HPLC指纹图谱并进行相似度评价,确定共有峰;同法测定芩连润肺汤中11种成分的含量;采用SPSS 21.0软件进行聚类分析,采用SIMCA 14.0软件进行有监督模式的OPLS-DA分析,并筛选影响其质量的标志物.结果:10批芩连润肺汤共有21个共有峰,与对照指纹图谱的相似度均大于0.98;共指认了11个共有峰,分别为芦丁、连翘酯苷A、连翘酯苷B、鸢尾苷、野鸢尾苷、黄芩苷、连翘苷、汉黄芩苷、黄芩素、次野鸢尾黄素、汉黄芩素.上述11种成分检测进样量的线性范围分别为9.9600～49.8000、1.9740～9.8700、0.6720～3.3600、0.9600～4.8000、0.5490～2.7450、5.0400～25.2000、1.3740～6.8700、0.6150～3.0750、0.7599～3.7950、0.1620～0.8100、0.0420～0.2100μg(r均大于0.999);精密度、稳定性(48 h)、重复性试验的RSD均小于2％;平均加样回收率为95.81％～100.29％(RSD为0.43％～1.73％,n=6);含量分别为8.9244～12.8208、0.3522～0.8687、0.4356～0.7112、0.3898～1.3090、0.3358～0.5301、1.6805～4.5423、0.7018～1.5842、2.2402～5.4425、2.3510～5.5589、0.1060～0.1822、0.0768～0.1289 mg/g.聚类分析结果显示,当类间距为10时,10批样品可聚为两类,S1～S3聚为一类、S4～S10聚为一类;当类间距为5时,第2类又可聚为两类,S6、S7、S9聚为一类,S4、S5、S8、S10聚为一类.OPLS-DA分析结果显示,S6、S7、S9位于得分图的上方,S4、S5、S8、S10位于得分图的左下侧,S1～S3位于得分图的右下侧,与聚类分析结果一致;黄芩苷、鸢尾苷、连翘酯苷A、黄芩素、汉黄芩苷的变量重要性投影值均大于1.结论:所建指纹图谱、含量测定方法的精密度较高、稳定性较好,结合多元统计分析可用于芩连润肺汤的质量控制.黄芩苷等5种成分为影响芩连润肺汤的质量标志物.