三七PnbHLH转录因子过表达与PnCAS RNAi协同作用对皂苷合成的影响

• 作者: 姜利 于怡琳 江敏 崔秀明 刘迪秋 葛锋
• 来源期刊: 中国中药杂志
• 关键词: 三七 皂苷 人参属 bHLH转录因子 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 分子生药学
• 页码范围: 94-102
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.19540/j.cnki.cjcmm.20201011.101

摘要

该研究克隆了三七转录因子基因PnbHLH,其开放阅读框长为966 bp,编码321个氨基酸.构建了三七转录因子PnbHLH过表达载体,成功实现了转录因子PnbHLH基因过表达与植物甾醇合成支路关键酶基因PnCAS RNAi在三七细胞中的整合,探讨过表达PnbHLH基因与PnCAS RNAi协同作用对三七皂苷生物合成的调控作用.结果 表明,转录因子PnbHLH能够与三七皂苷生物合成途径关键酶基因PnDS,PnSS和PnSE的启动子互作,进而通过调控关键酶基因的表达,间接影响皂苷的生物合成.进一步研究证明,过表达PnbHLH与PnCAS RNAi协同作用是调控皂苷生物合成更加高效的手段.与野生型和PnCAS RNAi三七细胞相比,过表达PnbHLH和PnCAS RNAi细胞系中,三七总皂苷和主要单体皂苷(Rd,Rb1,Re,Rg1,R1)的含量均有不同程度提高,说明皂苷生物合成的正向调节和反向调节2种方式产生了叠加效应.该研究既发挥了转录因子的“多点调控”优势,又整合了皂苷副产物支路的弱化调节,探索出针对三七皂苷生物合成更加合理而高效的调控策略.