糖络宁对高血糖大鼠血清外泌体中miR-322和IRE1α-RIDD表达的影响

• 作者: 姚伟洁 杨鑫伟 李潇 朱笳悦 韩朔 冯欣 许利平
• 来源期刊: 中草药
• 关键词: 糖络宁 内质网应激 外泌体 RSC96细胞 肌醇酶1α miR-322
• 年，卷（期）: 2021,（6）
• 所属期刊栏目: 药理与临床|Pharmacological Studies and Clinical Observations
• 页码范围: 1654-1661
• 页数: 8页
• 分类号: R285.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2021.06.013

摘要

目的 探讨糖络宁通过高血糖大鼠血清外泌体抑制细胞凋亡的机制.方法 SD大鼠分为对照组、模型组和糖络宁(10.9 g/kg)组.除对照组外,其余组大鼠ip链脲佐菌素诱导高血糖大鼠模型.给药组大鼠ig药物,对照组和模型组大鼠ig等体积蒸馏水,1次/d,连续12周.给药结束后,收集大鼠血清,采用差异离心法提取血清外泌体,使用大鼠雪旺细胞RSC96内化外泌体,将RSC96细胞分别与对照组、模型组、糖络宁组的大鼠血清外泌体共培养24 h.采用CCK-8法测定RSC96细胞活力;采用Western blotting法测定RSC96细胞中肌醇酶1α(inositol-requiring enzyme 1α,IRE1α)、磷酸化IRE1α(p-IRE1α)和蛋白质二硫键异构酶(protein disulfide isomerase A6,PDIA6)蛋白表达;采用qRT-PCR法测定外泌体中miR-322 mRNA表达,RSC96细胞中miR-322、IRE1α及IRE1依赖性衰解(IRE 1-dependent decay,RIDD)底物CD59、蛋白激酶D2 (proteinkinase D2,PKD2)、A类清道夫受体(scavenger receptor classA,SCARA)、蛋白水解酶D(peptidaseD,PEPD) mRNA表达.结果 与对照组比较,模型组血清外泌体数量显著增加(P＜0.01),外泌体及RSC96细胞中miR-322 mRNA水平显著降低(P＜0.05、0.01),RSC96细胞活力显著降低(P＜0.01),RSC96细胞IRE1α蛋白和mRNA表达水平显著升高(P＜0.01),PDIA6蛋白表达水平显著降低(P＜0.01),RIDD底物CD59、PKD2、SCARA和PEPDmRNA表达水平显著降低(P＜0.01);与模型组比较,糖络宁组血清外泌体数量明显降低(P＜0.05),外泌体及RSC96细胞中miR-322 mRNA水平显著升高(P＜0.05、0.01),RSC96细胞活力显著增加(P＜0.05),RSC96细胞IRE1α蛋白和mRNA表达水平显著降低(P＜0.05),PDIA6蛋白表达水平显著升高(P＜0.01),RIDD底物CD59、PKD2、SCARA和PEPDmRNA表达水平显著升高(P＜0.05、0.01).结论 糖络宁通过增加高血糖大鼠血清外泌体中miR-322 mRNA水平,从而抑制IRE1 α-RIDD诱导的细胞凋亡.