马齿苋酰胺E干预肾癌的作用机制研究

• 作者: 陈盛烨 黄航 叶挺宇 潘悦
• 来源期刊: 中草药
• 关键词: 肾癌 迁移 侵袭 马齿苋酰胺E VHL/HIF-1α信号通路
• 年，卷（期）: 2021,（6）
• 所属期刊栏目: 药理与临床|Pharmacological Studies and Clinical Observations
• 页码范围: 1672-1680
• 页数: 9页
• 分类号: R285.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2021.06.016

摘要

目的 探讨马齿苋酰胺E对人肾癌786-O细胞增殖、迁移和侵袭的作用及机制.方法 体外培养786-O细胞,给予马齿苋酰胺E(10、20、40 μmol/L)进行干预,采用CCK-8法检测细胞增殖情况;采用划痕实验检测细胞迁移能力;采用Transwell小室法检测细胞侵袭能力;采用AO/EB试剂盒检测细胞凋亡率.建立裸鼠移植瘤肾癌模型,给予马齿苋酰胺E(3、15 mg/kg)进行干预,测定各组裸鼠肿瘤质量及体积,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察肿瘤组织病理变化;采用Western blotting法检测786-O细胞和荷瘤裸鼠瘤组织中细胞增殖标志物如Ki67、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclearantigen,PCNA)及凋亡标志物如活化半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved Caspase-3)、Cleaved Caspase-9及侵袭相关蛋白如基质金属蛋白酶-2 (matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、MMP-9及希佩尔-林道抑癌基因(Von Hippel-Lindau,VHL)/缺氧诱导因子-1α (hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)通路相关蛋白VHL、HIF-1α的表达情况.结果 马齿苋酰胺E显著抑制786-O细胞活力(P＜0.05、0.01),下调Ki67、PCNA蛋白表达水平(P＜0.05、0.01);明显促进786-O细胞凋亡(P＜0.05、0.01),上调Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白表达水平(P＜0.05、0.01);有效改善786-O细胞迁移与侵袭能力(P＜0.05、0.01),显著降低MMP-2、MMP-9蛋白表达水平(P＜0.05、0.01);显著上调VHL蛋白表达水平(P＜0.05、0.01)并显著下调HIF-1α蛋白表达水平(P＜0.01).马齿苋酰胺E可有效降低荷瘤裸鼠肿瘤质量与体积(P＜0.05、0.01),抑制肿瘤细胞增殖并促进其凋亡,显著下调Ki-67、PCNA、MMP-2、MMP-9、HIF-1α蛋白表达水平(P＜0.05、0.01),显著上调CleavedCaspase-3、Cleaved Caspase-9、VHL蛋白表达水平(P＜0.05、0.01).结论 马齿苋酰胺E体外可有效抑制786-O细胞增殖、迁移与侵袭,促进786-O细胞凋亡,体内可有效降低荷瘤裸鼠肿瘤质量与体积,其作用机制可能与调控VHL/HIF通路及其下游蛋白表达有关.