黄芩苷通过上调miR-190表达缓解缺氧缺糖对神经细胞损伤的研究

• 作者: 吴艳荣 刘光伟 刘全忠 朱志强 王琳琳 郑颖颖 李昕
• 来源期刊: 中草药
• 关键词: 黄芩苷 miR-190 缺氧缺糖 神经元细胞 增殖 凋亡
• 年，卷（期）: 2021,（10）
• 所属期刊栏目: 药理与临床|Pharmacological Studies and Clinical Observations
• 页码范围: 3009-3017
• 页数: 9页
• 分类号: R285.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2021.10.018

摘要

目的 探讨黄芩苷对缺氧缺糖(oxygen-glucose deprivation,OGD)诱导的神经元细胞增殖、凋亡、炎症、氧化应激的影响及其对miR-190的调控作用.方法 采用OGD处理小鼠海马神经元HT22细胞建立细胞损伤模型,使用不同剂量(10、30 mg/L)的黄芩苷处理HT22细胞,分别将miR-NC、miR-190 mimics转染至HT22细胞后进行OGD处理(OGD+miR-NC组、OGD+miR-190组);分别将anti-miR-NC、anti-miR-190转染至HT22细胞后使用黄芩苷处理24 h,随后进行OGD处理(OGD+黄芩苷+anti-miR-NC组、OGD+黄芩苷+anti-miR-190组);采用MTT法检测细胞增殖情况;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用ELISA法检测白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的水平;采用2,4-二硝基苯肼显色法检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的活性;采用黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的含量:采用qRT-PCR法检测miR-190的表达量;Western blotting法检测细胞周期蛋白 1(Cyclin D1)、未剪切的半胱天冬酶-3(pro-cysteinyl aspartate-specific protease-3,pro-Caspase-3)、p21、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved-cysteinyl aspartate-specific protease-3,cleaved-Caspase-3)蛋白表达量.结果 OGD可明显降低HT22细胞活力及CyclinD1、pro-Caspase-3蛋白水平(P＜0.05),升高细胞凋亡率及p21、cleaved-Caspase-3蛋白水平(P＜0.05),并可提高IL-1β、TNF-α的水平及LDH的活性(P＜0.05),降低SOD的含量(P＜0.05);黄芩苷可明显提高OGD诱导的HT22细胞活力及CyclinD1、pro-Caspase-3蛋白水平(P＜0.05),降低细胞凋亡率及p21、cleaved-Caspase-3蛋白水平(P＜0.05),并可降低IL-1β、TNF-α的水平及LDH的活性(P＜0.05),升高SOD的含量(P＜0.05);OGD可明显降低HT22细胞中miR-190的表达水平(P＜0.05),而黄芩苷可明显升高miR-190的表达水平(P＜0.05);miR-190过表达对OGD诱导的HT22细胞增殖、凋亡、炎症及氧化应激的作用与黄芩苷的作用相似;抑制miR-190表达可明显逆转黄芩苷对OGD诱导的HT22细胞增殖、凋亡、炎症及氧化应激的作用.结论 黄芩苷可通过上调miR-190的表达而促进细胞增殖及抑制炎症反应、氧化应激、细胞凋亡从而减轻OGD诱导的神经元细胞损伤.