克雷伯氏菌产β-半乳糖苷酶的异源表达及低聚半乳糖合成工艺优化

• 作者: 李宗显 许丽亚 朱运平 郦金龙 李秀婷
• 来源期刊: 中国食品学报
• 关键词: 克雷伯氏菌B5582Y β-半乳糖苷酶 异源表达 最佳工艺 低聚半乳糖
• 年，卷（期）: 2021,（8）
• 所属期刊栏目: 加工技术|Process Technology
• 页码范围: 245-251
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.16429/j.1009-7848.2021.08.025

摘要

β-半乳糖苷酶是低聚半乳糖制备过程中的关键酶.本文克隆生菌株克雷伯氏菌B5582Y的β-半乳糖苷酶基因lacZ,并成功构建大肠杆菌重组质粒pET28a-24.经IPTG诱导表达其酶活力比野生菌株提升近10倍.通过单因素及响应面法考察重组酶对低聚半乳糖合成的影响,得到最佳工艺条件为:加酶量130U/mL,温度44℃,底物添加量90％,pH 7.0～7.5,反应时间10h,低聚半乳糖的产率达44％.重组酶表现出较好的转糖苷活性,在低聚半乳糖合成领域具有较大的应用潜力.