草鱼胰蛋白酶的亲和纯化及酶学性质

• 作者: 李晨 高柳芳 崔晓东 韩宇航 朱丹旭 李娇
• 来源期刊: 食品科学
• 关键词: 草鱼 胰蛋白酶 亲和纯化 酶学性质
• 年，卷（期）: 2021,（10）
• 所属期刊栏目: 生物工程|Bioengineering
• 页码范围: 178-183
• 页数: 6页
• 分类号: TS264.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-20200304-062

摘要

从草鱼肝胰腺中提取胰蛋白酶,经匀浆、硫酸铵分级沉淀、透析得到胰蛋白酶粗酶液,通过BTI-Sepharose亲和层析一步纯化得到电泳纯的草鱼胰蛋白酶,并进一步研究该胰蛋白酶的酶学性质.结果表明:草鱼胰蛋白酶的分子质量约为27?kDa,米氏常数Km为3.4×10-5?mol/L;最适反应温度为60?℃,在低于60?℃条件下稳定;最适pH值为9.5,酸碱耐受范围为pH?6.0～12.0;Ba2+、Mg2+、Fe2+在0～10 mmol/L范围内对该酶具有一定激活作用,而乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA)、K+在0～10 mmol/L范围内对该酶有一定抑制作用,EDTA较K+对酶的抑制作用更明显.