长链非编码RNA-TCONS_00041960对大鼠激素性股骨头坏死模型中成脂和成骨基因表达的影响

• 作者: 周杨 刘华 徐双燕 贾祯 孙肖雅 米洋 梅英武 王秀利 刘柯希 王义生 李月白
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 关键词: 长链非编码RNA 激素性股骨头坏死 干细胞 基因表达
• 年，卷（期）: 2021,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1748-1751
• 页数: 4页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn421213-20210106-01003

摘要

目的:观察长链非编码RNA(lncRNA)-TCONS_00041960在大鼠激素性股骨头坏死模型中对过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和成骨基因runt相关转录因子2(Runx2)表达的调控作用。方法:健康SD大鼠64只，随机分为4组：(1)正常对照组(Blank组)。每次臀肌注射2 ml生理盐水，连续3 d。(2)激素组(Dex组)。每次臀肌注射地塞米松20 mg/kg，连续3 d，制作大鼠激素性股骨头坏死模型。(3)无关序列组(Ex-NC+Dex组)。同法给予地塞米松，一侧股骨头内注入转染无关序列慢病毒载体的骨髓间充质干细胞(BMSCs)。(4)激素+重组慢病毒组(Ex-Lnc+Dex组)。同法给予地塞米松，一侧股骨头内注入转染重组lncRNA TCONS_00041960 lncRNA载体的BMSCS。于实验第4、8周提取各组大鼠股骨头组织中总RNA及总蛋白，应用TaqMan实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)与蛋白质印迹法(Western blot)检测成脂基因PPARγ、成骨特异性转录因子Runx2 mRNA及其蛋白表达。两样本两组间比较采用 t检验；数值变量资料统计采用方差分析，组间比较采用最小显著性差异法(LSD)。 结果:实验第4周，Ex-Lnc+Dex组股骨头细胞内PPARγ mRNA与蛋白呈低表达(1.129±0.024与0.366±0.007)，与Blank组(1.001±0.055与0.352±0.003)接近，差异均无统计学意义( t4w-mRNA＝3.052， P>0.05； t4w-蛋白＝3.227， P>0.05)；明显低于Dex组(2.351±0.086与0.836±0.032)、Ex-NC+Dex组(2.226±0.484与0.888±0.067)，差异均有统计学意义( F4w-mRNA＝296.841， P<0.01； F4w-蛋白＝196.684， P<0.01)。Ex-Lnc+Dex组Runx2 mRNA与蛋白呈高表达(1.176±0.036与0.963±0.014)，与Blank组(1.001±0.077与0.934±0.019)接近，差异均无统计学意义( t4w-mRNA＝2.893， P>0.05； t4w-蛋白＝2.154， P>0.05)；明显高于Dex组(0.522±0.007与0.501±0.005)、Ex-NC+Dex组(0.614±0.003与0.521±0.008)，差异均有统计学意义( F4w-mRNA＝376.700， P<0.01； F4w-蛋白＝2 239.834， P<0.01)。实验第8周各组表达量与第4周一致。 结论:重组lncRNA-TCONS_00041960载体能够有效下调大鼠激素性股骨头坏死(ONFH)模型股骨头细胞内成脂基因表达，同时显著上调细胞内成骨基因表达，可高效预防激素性ONFH的发生。