不同剂量流感病毒感染小鼠模型免疫应答的比较性研究

• 作者: 田晶 王宏杰 张轶博 隋天意
• 来源期刊: 现代预防医学
• 关键词: 不同剂量 流感病毒 炎症反应 免疫应答
• 年，卷（期）: 2021,（8）
• 所属期刊栏目: 实验技术及其应用|Experimental Technology and Applications
• 页码范围: 1473-1480
• 页数: 8页
• 分类号: R392.1
• 语种: 中文

摘要

目的 比较不同剂量流感病毒感染小鼠后肺组织急性损伤情况,初步探讨感染剂量与机体抗病毒的固有、适应性免疫应答的关系.方法 用流感病毒A/PR/8/34(PR8;H1N1)构建小鼠感染102PFU和103 PFU剂量模型,HE法检测肺组织损伤情况,HA法和免疫荧光染色法检测肺组织病毒滴度和感染程度,RT-PCR法检测肺组织炎性因子干扰素α(interferon-α,IFN-α)、干扰素β(interferon-α,IFN-β)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及Toll样受体7(Toll-like receptor-7,TLR7)、髓样分化因子88(myeloid differentiation primary response gene 88,MyD88)、肿瘤坏死因子受体相关蛋白6(TNFreceptor associated factor 6,TRAF6)和核因子κB(nuclear factor κB,NF-κB)mRNA水平,免疫组化法对肺组织TLR7、MyD88、TRAF6和NF-κB蛋白定位.流式细胞术检测肺组织、支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)和淋巴结中CD4+、CD8+T细胞比例.结果 与102 PFU组比较,103 PFU组小鼠肺组织病毒滴度显著升高(t=3.071,P=0.008),炎症因子IFN-α、IFN-β、IL=1β、IL-6、TNF-α mRNA水平上升(t=4.816,P=0.003;t=4.104,P=0.006;t=3.992,P=0.007;t=4.049,P=0.007;t=3.737,P=0.009),TLR7、MyD88、TRAF6和NF-κB mRNA水平有不同程度的升高(t=2.905,P=0.027;t=3.854,P=0.008;t=3.760,P=0.009;t=4.312,P=0.005)及蛋白表达显著增加(t=4.712,P=0.003;t=4.008,P=0.007;t=4.398,P=0.005;t 4.564,P=0.004),BALF、肺组织和淋巴结中CD4+T细胞比例呈上升趋势(t=3.771,P=0.009;t=2.463,P=0.049;t=3.386,P=0.015),BALF和肺组织CD8+T细胞比例上调(t=5.297,P=0.002;t=3.502,P=0.013).结论 病毒载量影响机体固有和适应性免疫应答状态,通过上调TLR7-MyD88-TRAF6-NF-κB信号通路促进下游炎症反应,并启动CD4+T和CD8+T细胞发挥抗病毒效应.