miR-93-5p抑制呼吸道合胞病毒感染支气管上皮细胞凋亡和炎症反应的机制研究

• 作者: 陈晔 黄雪 陈伟 李洪波 詹峰
• 来源期刊: 现代预防医学
• 关键词: miR-93-5p PPM1A 呼吸道合胞病毒 支气管上皮细胞 凋亡 炎症
• 年，卷（期）: 2021,（8）
• 所属期刊栏目: 实验技术及其应用|Experimental Technology and Applications
• 页码范围: 1481-1486,1502
• 页数: 7页
• 分类号: R562.2
• 语种: 中文

摘要

目的 研究miR-93-5p是否通过靶向Mg+/Mn2+依赖性蛋白磷酸酶1A (PPM1A)基因抑制呼吸道合胞病毒(RSV)感染的支气管上皮细胞凋亡和炎症反应.方法 将人支气管上皮细胞16-HBE分为NC组、RSV组、miR-NC+RSV组、miR-93-5p+ RSV组、si-NC+ RSV组、si-PPM1A+ RSV组、pcDNA-NC+ RSV组、pcDNA-PPM1A+RSV组、miR-93-5p+ pcDNA-NC+ RSV组、miR-93-5p+ pcDNA-PPM1A+ RSV组,利用脂质体Lipofectamine2000进行miR-NC、miR-93-5p、si-NC、si-PPM1A、pcDNA-NC、pcDNA-PPM1A的转染,并以RSV感染细胞.应用实时荧光定量PCR检测miR-93-5p和PPM1A mRNA表达,western blot测定PPM1A、Cleaved-caspase-3蛋白表达,ELISA分析TNF-α、IL-6和IL-1α分泌,流式细胞仪评估细胞凋亡.生物信息学预测与荧光素酶活性检测验证miR-93-5p对PPM1A的靶向调控.结果 与NC组比较,RSV组细胞16-HBE中miR-93-5p表达量减少,PPM1A mRNA和PPM1A蛋白、Cleaved-caspase-3蛋白表达量、TNF-α、IL-6、IL-1α分泌和细胞凋亡率增加.miR-93-5p+ RSV组细胞16-HBE中Cleaved-caspase-3蛋白水平、TNF-α、IL-6、IL-1αα分泌和细胞凋亡率低于miR-NC+ RSV组.miR-93-5p靶向调控PPM1A的表达.与si-NC+ RSV组比较,si-PPM1A+ RSV组细胞16-HBE中Cleaved-caspase-3蛋白水平、TNF-α、IL-6、IL-1 α分泌和细胞凋亡率降低,而pcDNA-PPM1A+RSV组结果与之相反.与miR-93-5p+ pcDNA-NC+ RSV组比较,miR-93-5p+ pcDNA-PPM1A+ RSV组提高细胞16-HBE的Cleaved-caspase-3蛋白水平、TNF-α、IL-6、IL-1α分泌、细胞凋亡率.上述差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 miR-93-5p通过靶向PPM1A基因,抑制RSV感染的支气管上皮细胞凋亡和炎症反应.