LncRNA-H19靶向miR-654-5p对人骨髓间充质干细胞成骨分化的促进效应研究

• 作者: 蒋励 许耀 王世龙 汤超亮 陈文钧
• 来源期刊: 海南医学
• 关键词: 长链非编码RNA H19 miR-654-5p 靶向作用 人骨髓间充质干细胞 成骨分化
• 年，卷（期）: 2021,（14）
• 所属期刊栏目: 基础研究|Basic Research
• 页码范围: 1769-1772
• 页数: 4页
• 分类号: R329.2+1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-6350.2021.14.001

摘要

目的 探讨长链非编码RNA H19(LncRNA-H19)靶向miR-654-5p对人骨髓间充质干细胞成骨分化的促进效应.方法 选取20只SPF级5～6周龄近交系BALB/c小鼠,分离及培养骨髓间充质干细胞,采用随机数表法分为阴性对照组、LncRNA-H19转染组和LncRNA-H19抑制组,LncRNA-H19转染组转染LncRNA-H19慢病毒载体、LncRNA-H19沉默质粒.采用MTT法检测细胞增殖,测定各组碱性磷酸酶活性(ALP),荧光素报告基因实验验证LncRNA-H19靶向miR-654-5p作用,Western blot检测BMP-2、OCN蛋白表达.结果 阴性对照组、LncRNA-H19转染组和LncRNA-H19抑制组细胞培养0 h、24 h、48 h及72 h时OD值比较差异无统计学意义(P>0.05);LncRNA-H19转染组ALP活性值为(13.11±1.92)U/gprot,明显高于阴性对照组的(9.65±1.12)U/gprot和LncRNA-H19抑制组的(5.30±1.20)U/gprot,差异均有统计学意义(P<0.05);LncRNA-H19转染组miR-654-5p-3'UTR调节的荧光素酶活性为0.612±0.099,明显低于阴性对照组的1.010±0.100和LncRNA-H19抑制组的1.453±0.102,差异均有统计学意义(P<0.05);各组miR-654-5p-突变型3'UTR调节的荧光素酶活性比较差异无统计学意义(P>0.05);LncRNA-H19转染组BMP-2、OCN蛋白相对量为1.102±0.102、1.242±0.088,明显高于阴性对照组的0.493±0.100、0.372±0.094和LncRNA-H19抑制组的0.202±0.082、0.182±0.092(P<0.05).结论 LncRNA-H19通过靶向miR-654-5p促进人骨髓间充质干细胞向成骨分化,可能与调控MMP-2、OCN蛋白表达有关.