牡丹的基因组DNA提取与ISSR引物筛选

• 作者: 李会云 程孟雪 李勇慧 刘忠艳
• 来源期刊: 江苏农业科学
• 关键词: 牡丹 DNA提取 ISSR引物筛选 PCR扩增 改良的CTAB法
• 年，卷（期）: 2021,（15）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 58-63
• 页数: 6页
• 分类号: S685.110.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2021.15.010

摘要

为了研究牡丹种质资源的遗传多样性和DNA鉴定,采用ISSR标记的方法来进行试验,即采用改良的CTAB法从成熟干燥的牡丹叶片中提取基因组DNA,其质量检测采用琼脂糖凝胶电泳法和超微量分光光度计法,用优化的ISSR-PCR反应系统,对加拿大哥伦比亚大学(University of British Columbia,UBC)公布的220条ISSR引物进行筛选.结果表明,从6个牡丹品种的叶片中提取的DNA浓度范围在30×10-3～100×10-3μg/μL之间,DNA样品纯度D260 nm/D280 nm比值在1.7～1.9之间;从220条ISSR引物中筛选出了12条适合牡丹的扩增结果好的引物,选出的引物扩增条带清晰、多态性高、重复性好.说明提取的DNA质量较好,该改良的CTAB法适用于从蛋白质和酚类物质含量较高的植物材料中提取基因组DNA;筛选出的12条ISSR引物为进一步研究牡丹资源的遗传多样性奠定了基础.