枸杞果胶酯酶基因LbPME克隆及表达分析

• 作者: 李浩霞 尹跃 杨斌 安巍 赵建华
• 来源期刊: 江苏农业科学
• 关键词: 枸杞 果胶酯酶基因 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2021,（18）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 33-38
• 页数: 6页
• 分类号: S188
• 语种: 中文
• DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2021.18.006

摘要

以宁夏枸杞(Lycium barbarum L.)'宁杞1号'果实为材料,利用RT-PCR技术,克隆出LbPME的全长序列为1152 bp,包含完整的开放阅读框(ORF),编码有384个氨基酸,蛋白质分子量为42.63 ku,理论等电点9.20;LbPME编码的蛋白包含2个可能的N-糖基化结合位点(Asn46和Asn183),4个底物结合位点(Thr166、Gln201、Arg301和Trp303)和2个酶活性位点(Asp224和Asp245).分析发现,该蛋白由多个呈右手螺旋的β折叠肽链组成,且含有1个中空三角柱状的PME经典结构;LbPME与茄科的烟草的同源性达到90.86％.利用实时荧光定量技术,发现不同组织中Lb PME均有表达,且在茎中最高而叶中最低,两者存在显著差异;随着果实的发育,Lb PME表达量呈现出先升后降趋势,在青果期表达量最高,随后显著降低,在成熟期维持较低水平.本研究结果为进一步探讨枸杞Lb PME的功能奠定了基础.