shRNA沉默软骨素聚合因子基因对脑胶质瘤细胞活性的影响

• 作者: 吴海涛 陈小忠 赵洪新 申昊 杨朝志 岳翔 张平 王培
• 来源期刊: 中国老年学杂志
• 关键词: 脑胶质瘤细胞 软骨素聚合因子 shRNA 细胞增殖 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2021,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1466-1470
• 页数: 5页
• 分类号: R739.41
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9202.2021.07.035

摘要

目的 探讨shRNA沉默软骨素聚合因子(ChPF)基因对脑胶质瘤细胞活性的影响及可能作用机制.方法 使用携带有靶向ChPF基因shRNA(ChPF-shRNA)的重组慢病毒转染人脑胶质瘤A172细胞,RT-PCR和Western印迹检测细胞中ChPF mRNA和蛋白表达水平;CCK-8法检测细胞增殖水平;流式细胞术检测细胞周期及凋亡水平.进一步使用单核细胞趋化蛋白(CCL2)-shRNA转染人脑胶质瘤A172细胞,RT-PCR和Western印迹检测细胞中CCL2、ChPF mRNA和蛋白表达水平.结果 ChPF-shRNA组ChPF mRNA和蛋白相对表达量明显低于空白对照组和Nc-shRNA组(P<0.01).ChPF-shRNA转入人脑胶质瘤A172细胞后,与空白对照组、Nc-shRNA组相比,ChPF-shRNA组细胞增殖能力明显减弱(P<0.05).ChPF-shR-NA组S期、G2/M期的细胞比例明显低于空白对照组、Nc-shRNA组,G0/G1期的细胞比例明显高于空白对照组、Nc-shRNA组(P<0.05).ChPF-shRNA组细胞凋亡率明显高于空白对照组、Nc-shRNA组(P<0.01).ChPF-shRNA组穿过小室膜的细胞数明显少于空白对照组、Nc-shRNA组(P<0.01).ChPF-shRNA组人脑胶质瘤A172细胞CCL2 mRNA和蛋白相对表达量明显低于空白对照组与Nc-shRNA组(P<0.01).转染CCL2-shRNA后,CCL2-shRNA组人脑胶质瘤A172细胞CCL2 mRNA和蛋白相对表达量明显低于空白对照组与Nc-shRNA组(P<0.01);ChPF mRNA和蛋白相对表达量在各组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 ChPF基因表达下调可能通过调控CCL2来抑制人脑胶质瘤细胞的增殖、侵袭,促进细胞凋亡.