牛膝醇提物调控滑膜成纤维细胞外泌体抑制软骨细胞外基质降解

• 作者: 高坤 陈大宇 张勇 刘伟东 孙淑芬 赖文强 马笃军 吴益宏 林展鹏 蒋鹰鹭 余伟吉
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 牛膝 骨性关节炎 滑膜 外泌体 兔 模型
• 年，卷（期）: 2021,（23）
• 所属期刊栏目: 软骨组织构建
• 页码范围: 3636-3640
• 页数: 5页
• 分类号: R452|R318|R274
• 语种: 中文

摘要

背景:牛膝抑制软骨基质降解、促进膝关节软骨细胞修复的机制目前尚不清楚.外泌体在膝关节滑膜液中广泛存在,其携带大量的细胞因子,发挥特定的生物学功能,对基质金属蛋白酶具有调节作用.推测牛膝有可能通过外泌体发挥对膝骨关节炎的治疗作用.目的:探讨牛膝醇提物能否调控滑膜成纤维细胞外泌体抑制软骨细胞外基质降解.方法:①培养正常兔滑膜成纤维细胞,分别应用PBS、100 mg/L牛膝醇提物或10 mmol/L氨基葡萄糖进行体外干预,提取细胞培养上清液中的外泌体,记为EXOs-PBS、EXOs-牛膝醇、EXOs-氨基葡萄糖;②构建实验兔膝骨关节炎模型,关节腔分别注射EXOs-PBS(空白对照组)、EXOs-牛膝醇(实验组)、EXOs-氨基葡萄糖(阳性对照组),1次/周,连续注射5次;治疗前后测定关节活动度,计算关节粘连的改善度;抽取膝关节滑膜液,利用酶联蛋白免疫法检测基质金属蛋白酶1,3,9水平;提取关节软骨基质,利用DMB染色试剂盒检测软骨基质糖胺聚糖含量.结果与结论:①成功提取滑膜成纤维细胞来源外泌体;②实验组兔关节粘连的改善度为(74.60±8.05)％,明显高于空白对照组(54.00±6.96)％(P<0.05);实验组兔膝关节滑膜液内基质金属蛋白酶1,3水平均明显低于空白对照组(P<0.05);实验组兔关节软骨基质内糖胺聚糖含量为(330.83±26.71)mg/L,明显高于空白对照组(258.21±41.76)mg/L(P<0.05);实验组上述指标结果与阳性对照组基本持平(P>0.05);④提示:牛膝醇提物能干预滑膜成纤维细胞外泌体的功能,改善膝骨关节炎模型兔的膝关节活动度,降低滑膜液内基质金属蛋白酶1,3的表达水平,升高糖胺聚糖水平,抑制细胞外基质的降解,保护关节软骨.