依维莫司干预肾癌细胞时解偶联蛋白2对能量代谢的影响及意义

• 作者: 罗浩鸣 谷江 张永春 沈亚楠
• 来源期刊: 山东医药
• 关键词: 肾癌 依维莫司 细胞增殖 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2021,（22）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 42-47
• 页数: 6页
• 分类号: R737.11
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2021.22.010

摘要

目的 探讨依维莫司干预肾癌细胞时解偶联蛋白2(UCP2)表达的变化对肾癌细胞生长、凋亡的影响及对线粒体能量代谢中糖酵解途径的影响.方法 使用不同浓度的依维莫司干预GRC-1细胞,计算半数抑制浓度(IC50).将GRC-1分为对照组、初始浓度组、低浓度组、中浓度组、高浓度组,根据IC50结果,使用不同浓度(0、1/8 IC50、1/4 IC50、1/2 IC50、IC50)的依维莫司干预.干预72 h后,用MTT法检测细胞增殖,计算细胞增殖抑制率;用流式细胞术测算细胞凋亡率;用反转录PCR法检测细胞中的UCP2 mRNA表达;用相关试剂盒检测细胞M2-型丙酮酸激酶(PKM2)和异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)活性;用分光光度计检测细胞中三磷酸腺苷(ATP)水平.结果 依维莫司对GRC-1细胞的IC50为29.60μmol/L.依维莫司对GRC-1细胞抑制率随着依维莫司浓度增加而增高,除中、高浓度组外,各组两两比较P均<0.05.细胞凋亡情况与初始、低、中浓度组中依维莫司浓度增加趋势一致,高浓度组细胞凋亡率比中浓度组下降(P均<0.05).高浓度组细胞中UCP2 mRNA表达较其他各组高(P均<0.05).细胞中ATP水平及PKM2活性随着依维莫司浓度增加而降低,在高浓度组中出现一定程度的恢复.IDH1活性在各浓度组中变化不大,在高浓度组中出现明显下降(P均<0.05).结论 UCP2可能通过刺激PKM2活性,使肾癌细胞中线粒体能量代谢方式向糖酵解途径倾斜,导致肾癌细胞增殖活跃,细胞凋亡减缓,影响依维莫司对肾癌细胞的抑制效应.