类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡与MAPK/ERK5信号通路的介导

• 作者: 曲向阳 宋钦勇
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 关键词: 滑膜细胞 类风湿关节炎 机械敏感性离子通道 凋亡 钙离子 通路 牵张应力
• 年，卷（期）: 2021,（26）
• 所属期刊栏目: 组织构建细胞学实验|Muscle, tendon and ligament tissue
• 页码范围: 4156-4161
• 页数: 6页
• 分类号: R459.9|R394.2|R593.22
• 语种: 中文

摘要

背景:既往研究大多关注类风湿关节炎发病过程中的免疫因素,近年来生物力学因素在类风湿关节炎疾病发生和发展中的作用也越来越引起人们的重视.目的:探究Piezo1通过MAPK/ERK5信号通路介导类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡的相关机制.方法:采用组织块法分离培养类风湿关节炎滑膜细胞,利用Flexcell 5000T细胞牵张应力系统构建体外细胞牵张应力模型,构建Piezo1 siRNA基因干扰载体和过表达质粒,根据预实验结果及处理方案,将类风湿关节炎来源滑膜细胞分成6组,即siRNA干扰组、过表达质粒组、空白对照组、siRNA干扰+BIX02188组、过表达质粒+BIX02188组、空白对照+BIX02188组.采用RT-PCR检测Piezo1、ERK5和凋亡相关基因的表达,Fluo-3 AM探针检测细胞内钙离子含量,AV-PI试剂盒检测细胞凋亡水平.结果与结论:①siRNA干扰+BIX02188组细胞内钙离子含量要明显低于siRNA干扰组(P<0.05);过表达质粒+BIX02188组细胞内钙离子含量要明显低于过表达质粒组(P<0.05);②siRNA干扰组的Piezo1、ERK5 mRNA相对表达量要明显低于空白对照组(P<0.05),过表达质粒组明显高于空白对照组(P<0.05);MAPK/ERK5抑制剂BIX02188处理后,Piezo1 mRNA的表达量无明显变化,但是siRNA干扰+BIX02188组的ERK5 mRNA相对表达量要明显低于siRNA干扰组(P<0.05),过表达质粒+BIX02188组的ERK5 mRNA相对表达量要明显低于过表达质粒组(P<0.05);③siRNA干扰组的细胞早期凋亡率、晚期凋亡率和总凋亡率要明显低于空白对照组(P<0.05);过表达质粒组明显高于空白对照组(P<0.05);④结果表明,Piezo1蛋白的过度表达可以促进类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡,并且促凋亡信号通过MAPK/ERK5信号通路介导,可以作为类风湿关节炎治疗的潜在基因靶点.