慢病毒介导的RNA干扰对乙型脑炎病毒感染的抑制作用

• 作者: 冯晓娟 郑倩 冯亚岚 黄荣 杨健 袁磊
• 来源期刊: 川北医学院学报
• 关键词: 乙型脑炎病毒 慢病毒 RNA干扰 抗病毒
• 年，卷（期）: 2022,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 692-696
• 页数: 4页
• 分类号: R373.31
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969／j.issn.1005-3697.2022.06.002

摘要

目的:研究由慢病毒介导的RNA干扰对乙型脑炎病毒(JEV)感染细胞与小鼠的抑制作用。方法:以JEV的C、NS3、NS4A和NS5基因为靶点，设计特异性siRNA序列，并构建重组传导慢病毒。对慢病毒预处理的BHK21细胞接种JEV,并通过相对定量PCR、病毒蚀斑和间接免疫荧光实验检测慢病毒对JEV的抑制作用。对慢病毒预处理的7日龄乳鼠脑内接种JEV,5 d后测定其脑组织中的病毒滴度；选取3周龄小鼠做攻毒保护实验。结果:在细胞中，4种重组慢病毒均使JEV的RNA载量与病毒滴度降低(P<0.05),其中LV-C组的RNA载量降低了89.7%,病毒滴度下降约1 200倍。4组乳鼠的脑组织中，JEV病毒滴度均降低(P<0.05),其中LV-C组病毒滴度下降约1 700倍；4种重组慢病毒对3周龄小鼠的攻毒保护率为50%～70%。结论:由慢病毒介导的靶向JEV的C、NS3、NS4A与NS5基因的RNAi对JEV感染细胞与小鼠具有抑制作用，且有一定持续性，其中靶向C基因的RNAi的抗病毒效果最强。