γ-分泌酶抑制剂在肺纤维化上皮间质转化中的作用

• 作者: 韩姣 王华兵 徐玲文 董芳
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 转化生长因子β1 肺纤维化 上皮-间充质转化 γ-分泌酶抑制剂
• 年，卷（期）: 2022,（9）
• 所属期刊栏目: 细胞与分子生物学
• 页码范围: 917-920
• 页数: 3页
• 分类号: R563.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.11958/20220307

摘要

目的 检测体外转化生长因子（TGF）-β1诱导肺纤维化上皮间质转化（EMT）的形成情况并检测Notch信号特异性抑制剂γ-分泌酶抑制剂（DAPT）对其影响及可能机制。方法 将A549细胞分成对照组（RPMI 1640完全培养基培养）、TGF-β1组（在含有10µg/L TGF-β1的RPMI 1640培养基中培养）、TGF-β1+DAPT组（在含有10µg/L TGF-β1和2µmol DAPT的RPMI 1640培养基中培养）、DAPT组（在含有2µmol DAPT的RPMI 1640培养基中培养）。通过倒置显微镜观察细胞形态，实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测肺泡上皮细胞特异性蛋白E-钙黏合素以及间质细胞特异性蛋白α-肌动蛋白（α-SMA）mRNA相对表达水平，Western blot检测E-钙黏合素以及α-SMA蛋白表达水平。结果 倒置显微镜检查示，对照组细胞呈多边形，铺路石样，细胞间连接紧密；TGF-β1组细胞呈梭行，纺锤状，细胞间连接减少；TGF-β1+DAPT组仅有少量细胞呈梭形，多数细胞形态与对照组相似；DAPT组细胞形态大致同对照组。与对照组相比，TGF-β1组α-SMA蛋白及mRNA表达增加，而E-钙黏合素蛋白及mRNA表达减弱（P＜0.05）；与TGF-β1组比较，TGF-β1+DAPT组α-SMA蛋白及mRNA表达水平降低，而E-钙黏合素蛋白及mRNA表达水平增加（P＜0.05）；DAPT组与对照组2指标的蛋白与mRNA相对表达水平差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 TGF-β1可诱导肺上皮间质转化，而Notch信号抑制剂DAPT能够阻断、部分或全部逆转这一过程。