Notch3调控Hes2逆转三阴性乳腺癌上皮-间质转化的机制研究

• 作者: 田园 牟雅君 杨文秀 豆晓伟
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 三阴性乳腺癌 上皮-间质转化 Notch3 Hes2 MDA-MB-231细胞 肿瘤转移
• 年，卷（期）: 2022,（8）
• 所属期刊栏目: 细胞与分子生物学
• 页码范围: 785-790
• 页数: 5页
• 分类号: R737.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.11958/20220306

摘要

目的 探究Notch3逆转三阴性乳腺癌（TNBC）上皮-间质转化（EMT）及抑制肿瘤转移的分子机制。方法 将Notch3过表达质粒（pcDNA3.1-Notch3-GFP）及其阴性对照质粒（pcDNA3.1-NC-GFP）、Hes2敲低的小分子干扰质粒（si-Hes2-GFP）及其阴性对照质粒（si-NC-GFP）转染TNBC MDA-MB-231细胞，分为对照组（不进行任何转染）、pc-NC组（转染pcDNA3.1-NC-GFP）、Notch3过表达组（pc-Notch3组，转染pcDNA3.1-Notch3-GFP）、Notch3过表达+si-NC组（pc-Notch3+si-NC组，共转染pcDNA3.1-Notch3-GFP和si-NC-GFP）、Notch3过表达+Hes2敲低组（pc-Notch3+si-Hes2组，共转染pcDNA3.1-Notch3-GFP和si-Hes2-GFP）。采用实时荧光定量PCR和Western blot分别检测细胞Notch3、Hes2 mRNA和蛋白表达；细胞计数试剂盒-8检测细胞增殖活性；划痕愈合实验和Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力；Western blot检测细胞EMT相关蛋白[E-钙黏蛋白（E-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）]表达。结果 与对照组和pc-NC组比较，pc-Notch3组和pc-Notch3+si-NC组Notch3、Hes2 mRNA和蛋白、E-cadherin蛋白水平显著升高，细胞增殖活性、迁移率、穿膜细胞数、Vimentin蛋白水平显著降低（P<0.05）；与pc-Notch3组和pc-Notch3+si-NC组比较，pc-Notch3+si-Hes2组Hes2 mRNA和蛋白、E-cadherin蛋白水平显著降低，细胞增殖活性、迁移率、穿膜细胞数、Vimentin蛋白水平显著升高（P<0.05）。结论 Notch3可能通过上调Hes2来逆转TNBC的EMT，抑制肿瘤转移。