TNF-α/hs-CRP双标记时间分辨荧光免疫法用于脓毒症早期筛查诊断的研究

• 作者: 李云鹏 郝培远 曹雪明 闫兆月 王恩锋 黄书满 代荣钦
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 脓毒症 肿瘤坏死因子-α 超敏C-反应蛋白 双标记时间分辨荧光免疫法
• 年，卷（期）: 2022,（8）
• 所属期刊栏目: 应用研究
• 页码范围: 868-872
• 页数: 4页
• 分类号: R446
• 语种: 中文
• DOI: 10.11958/20220176

摘要

目的 建立一种双标记时间分辨荧光免疫法（TRFIA）用于定量检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和超敏C-反应蛋白（hs-CRP）水平。方法 将抗TNF-α和hs-CRP单克隆抗体包被在96孔板，制备铕（Eu3+）和钐（Sm3+）检测抗体偶联物，建立双抗体夹心TRFIA法并组装成试剂盒，评价此试剂盒的灵敏度、线性范围、加标回收率和各项检测性能。结果 建立了TRFIA检测血清TNF-α和hs-CRP水平的新方法并组装成试剂盒，此试剂盒对TNF-α检测的线性范围为0~100 ng/L，灵敏度为0.05 ng/L，对hs-CRP检测的线性范围为0~100 mg/L，灵敏度为0.02 mg/L；对TNF-α检测的加标回收率92.00%~107.00%，对hs-CRP检测的加标回收率95.00%~106.82%，与其他常见的血清干扰物质无明显的交叉反应；对TNF-α检测的批内CV 4.57%~9.24%，批间CV 5.13%~9.27%；对hs-CRP检测的批内CV 3.57%~7.69%，批间CV 6.07%~10.00%；试剂盒能够在4 ℃稳定保存6个月，37 ℃下可稳定保存7 d以上。TNF-α的检测阈值为0.44 ng/L，hs-CRP的检测阈值为1.41 mg/L。该试剂盒检测判定结果与临床情况相一致，符合率100%。结论 双标记TRFIA法可定量检测TNF-α和hs-CRP水平，具有灵敏度和准确度高、特异性强、方便快捷等优点，可为脓毒症临床样品的早期筛查、疗效评价和预后评估提供一种新的检测方法。