扶正化瘀方通过改变急性肝损伤小鼠模型肝脏CD8+T淋巴细胞表型功能预防肝纤维化的价值分析

• 作者: 黄辉 徐列明 平键 周扬
• 学科: 医学
• 关键词: 肝硬化 扶正化瘀方 肝星状细胞 CD8阳性T淋巴细胞
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 所属期刊栏目: 肝纤维化及肝硬化
• 页码范围: 342-346
• 页数: 4页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-5256.2022.02.017

摘要

目的 观察应用扶正化瘀方后急性肝损伤小鼠模型肝脏CD8+T淋巴细胞对共培养的肝星状细胞的影响，探讨扶正化瘀方预防肝纤维化的作用机制。方法18只SPF级雄性C57BL/6NCrl Vr小鼠随机分为正常组、模型组、扶正化瘀方组，每组6只。扶正化瘀方组提前给予扶正化瘀方灌胃5d。实验前12h以2mL/kg体质量的剂量腹腔注射10%的CCl4，腹主静脉取血，留取血清并检测ALT、AST，留取部分肝脏做病理观察；应用流式细胞术分选小鼠肝脏CD8+T淋巴细胞，预先小鼠体内用药，再与小鼠肝星状细胞株(JS1)以2∶1比例共培养于96孔板中24h、48h，使用qPCR方法检测各组Col.ⅠmRNA和α-SMA mRNA表达变化。符合正态分布的计量资料多组间比较采用方差分析，进一步两两比较采用SNK-q或LSD-t检验。结果模型组的ALT和AST水平均显著高于正常组(P值均<0.0001)。扶正化瘀方组小鼠的ALT升高的幅度明显小于模型组(P<0.001)。HE染色显示，扶正化瘀方组小鼠肝细胞变性、坏死程度较模型组有所减轻。与正常组比较，模型组总淋巴细胞、CD45、CD4-CD8+T、CD8+CD28-T显著上升，而扶正化瘀方组与模型组相比较，上述淋巴细胞比例显著降低(P值均<0.001)。自各组小鼠肝脏分离的CD8+T淋巴细胞与JS1共培养48h，模型组与对照组(JS1单培养)和正常组相比α-SMA mRNA的表达明显增加(P值均<0.01)；Col.ⅠmRNA表达也明显高于对照组和正常组(正常小鼠肝脏CD8+T淋巴细胞与JS1共培养)(P值均<0.001)。扶正化瘀方组α-SMA mRNA和Col.ⅠmRNA表达显著低于模型组(P值均<0.01)。结论扶正化瘀方能通过改变小鼠肝脏CD8+T淋巴细胞功能表型间接抑制活化的肝星状细胞。