广西家蚕僵病流行趋势及其主要病原遗传规律研究

• 作者: 唐亮 胡文娟 蒋满贵 黄深惠 董桂清 李标 唐名艳 赵烨芸 何骥 潘志新
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 家蚕 僵病 球孢白僵菌 ITS序列 ISSR多态性分析 白僵菌农药
• 年，卷（期）: 2022,（7）
• 所属期刊栏目: 优秀青年学者论坛
• 页码范围: 1785-1795
• 页数: 10页
• 分类号: S884.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2022.07.001

摘要

【目的】摸清广西家蚕僵病发生流行规律，研究病原特性及遗传规律，为精准防控家蚕僵病提供科学依据。【方法】以2008—2021年广西家蚕僵病发病原始数据为基础，分析广西家蚕僵病的发病规律。收集广西五大蚕区（桂中、桂南、桂西、桂西北和桂东南）的病蚕、病虫及生物防控白僵菌株，经显微形态鉴定和产孢测定后采用滤纸接触法测试其对家蚕的致病力；基于ITS4/ITS5引物进行PCR扩增，并将双向测序结果输入GenBank进行BLAST比对分析；根据ISSR-PCR扩增结果以Quantity One绘制电泳模式图，使用NTsys计算遗传相似系数并进行UPGMA聚类分析，同时以PopGene32对供试材料的遗传多样性指数进行分析。【结果】2008—2021年广西家蚕僵病发病率整体上呈波动下降趋势，连续14年的平均发病率为5.19%。5月是广西家蚕僵病的发病率高峰，平均发病率为13.37%；其次是4月和10月，对应的发病率分别为7.91%和6.87%。山区地形的家蚕僵病发生率普遍高于平缓丘陵地区，其中，丘陵蚕区的家蚕僵病发病率排序为桂中（13.55%）>桂西北（12.66%）>桂南（11.56%）>桂西（11.05%）>桂东南（9.53%），山地蚕区的家蚕僵病发病率排序为桂中（18.91%）>桂西北（17.96%）>桂西（16.01%）>桂西（14.90%）>桂东南（11.61%）。广西家蚕僵病病原包括白僵菌属、曲霉属、拟青霉属和虫草菌属，其中球孢白僵菌（Beauveria bassiana）为主要病原，占比达86.67%，且白僵菌ITS序列高度保守，序列相似性在97.83%~99.83%。不同白僵菌株对家蚕的致病力表现为崇左白僵菌株（农药）的72 h累计死亡率达100.00%，明显高于蚕区僵蚕菌株（8.89%~93.33%）。筛选出的10条ISSR引物从50株菌株样本中扩增出152条清晰条带，其中多态位点147个，多态百分数为87.5%~100.0%；50株菌株样本的Nei?s基因多样性指数（H）为0.1740~0.3257，Shannon信息多样性指数（I）为0.2840~0.4880，均表现出极高的遗传多样性；基于遗传距离构建的UPGMA系统发育进化树显示，桂南、桂西北、桂东南、桂中等蚕区的病蚕白僵菌株与农药源白僵菌株存在非常近的亲缘关系。【结论】广西家蚕僵病危害高峰期为5月，球孢白僵菌是最主要的病原菌，且ITS序列高度保守。不同来源白僵菌对家蚕致病力的排序为农药源白僵菌株>松林白僵菌株>蚕区僵蚕菌株，但三者相互间存在非常高的基因关联性，提示广西家蚕僵病的病原遗传背景复杂，且蚕桑主产区应慎用白僵菌农药。