茶尺蠖丝氨酸蛋白酶基因EoSP1的克隆、时空表达及对饥饿的表达响应

• 作者: 张新 陈成聪 杜琴 李喜旺 孙晓玲
• 学科: 农学
• 关键词: 茶尺蠖 丝氨酸蛋白酶 克隆 表达分析
• 年，卷（期）: 2022,（6）
• 页码范围: 669-680
• 页数: 11页
• 分类号: S435.711,Q52
• 语种: 中文

摘要

丝氨酸蛋白酶是鳞翅目昆虫消化系统中一类重要的蛋白酶。本研究从茶尺蠖（Ectropis obliqua）中克隆到一条丝氨酸蛋白酶基因EoSP1并分析了其结构特征和表达特性。EoSP1基因序列全长858bp，编码285个氨基酸，预测蛋白分子量为29.53kDa，等电点为5.44。经与其他丝氨酸蛋白酶比对，EoSP1含有保守的丝氨酸蛋白酶催化位点（H95，A161和S328）及蛋白互作结构域，与蓓带夜蛾（Mamestra configurata）中SPs亲缘关系较近。进一步获得了与EoSP1-GST融合蛋白大小接近的目的蛋白。qRT-PCR分析发现，EoSP1在幼虫期的表达显著高于成虫、蛹和卵期，并在幼虫中肠中特异性表达；饥饿处理后EoSP1表达下降，恢复饲喂后表达量接近对照组。以上结果为茶尺蠖消化酶功能解析及抗虫新靶点的筛选提供了依据。