茶树黄金芽CsHIPP26.1蛋白螯合离子的筛选与鉴定

• 作者: 刘富浩 范延艮 王域 孟凡月 张丽霞
• 来源期刊: 茶叶科学
• 学科: 农学
• 关键词: 重金属异戊二烯植物蛋白 CsHIPP26.1 金属离子 茶树
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告|Research Paper
• 页码范围: 179-186
• 页数: 8页
• 分类号: S571.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-369X.2022.02.003

摘要

重金属相关异戊二烯化植物蛋白(HIPPs)由于其独特的重金属结合域和异戊二烯序列的结构特点,成为一类重要的金属分子伴侣.为鉴定茶树(Camellia sinensis)黄金芽CsHIPP26.1蛋白的螯合离子,将pET-32a-CsHIPP26.1重组质粒和空载体分别转入大肠杆菌BL21,在分别添加4 mol·L-1的单一金属离子(CuCl2、ZnCl2、MgCl2、FeCl3、CaCl2)或5种金属离子混合液以及1 mmol·L-1 IPTG诱导的LB液体中培养,观测大肠杆菌的生长情况,并用His-tag蛋白纯化磁珠纯化获得融合目的蛋白,经原子吸收分光光度计分析融合蛋白中金属离子含量,计算蛋白螯合的离子数目.结果表明,CsHIPP26.1蛋白仅与Zn2+和Cu2+螯合,且螯合Zn2+的能力显著强于Cu2+.根据其结合金属离子与目的蛋白质量摩尔比推测,CsHIPP26.1蛋白螯合Zn2+、Cu2+金属离子的最大数目分别为2和1.