荧光定量PCR法定量检测混合烟叶中的红花大金元

• 作者: 李萌 候宁宁 曲鹏 王旭东 宋嘉宝 孙九喆 马林
• 来源期刊: 烟草科技
• 学科: 农学
• 关键词: 红花大金元 烟叶 荧光定量PCR TaqMan MGB探针 烟叶品种识别
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 烟草农学|Tobacco Agronomy
• 页码范围: 25-32
• 页数: 8页
• 分类号: S572.02
• 语种: 中文

摘要

为检测混合烟叶中红花大金元烟叶,设计了红花大金元品种特异性引物与TaqMan MGB探针,检测了引物和探针的特异性和灵敏性,确定了荧光定量PCR反应条件,并在此基础上建立标准曲线对混合烟叶中红花大金元单一品种进行定量检测.结果表明,引物与探针组合H1-R/F/T的特异性较好,建立了标准曲线方程,决定系数R2为0.997.当DNA(55 ng·μL-1)模板含量为2μL时,红花大金元的检测限可达0.11 ng.利用该方法对混合烟叶样品中红花大金元含量进行检测,误差范围在2.5％～3.5％之间,表明该方法可应用于特定混合样品中红花大金元烟叶的定量检测.