茶尺蠖类免疫球蛋白基因EoHML的克隆和表达分析

• 作者: 余玉庚 袁志军 殷坤山 付建玉 肖强
• 学科: 农学
• 关键词: 茶尺蠖 类免疫球蛋白 基因克隆 表达分析
• 年，卷（期）: 2022,（4）
• 页码范围: 307-315
• 页数: 8页
• 分类号: S571.1,S435.711
• 语种: 中文

摘要

类免疫球蛋白（Hemolin）是一种鳞翅目昆虫特有的免疫相关蛋白，也是唯一的无脊椎动物免疫球蛋白家族成员。本实验应用RACE技术获得了茶尺蠖（Ectropis obliqua Prout）类免疫球蛋白基因的全长cDNA序列，命名为EoHML（GenBank登录号：KM885983），并分析了相关生物信息学特性，检测了病毒感染后基因的表达水平。结果表明，EoHML基因序列全长1772bp，包含1239bp的开放阅读框，编码412个氨基酸，预测蛋白分子量大小为45.8kD，等电点（pI）为8.297，属于典型的分泌型蛋白，且具有昆虫Hemolin基因保守的4个Ig功能区和2个N-glycosylation位点。系统进化分析表明，该蛋白与目前已知的类免疫球蛋白氨基酸序列的亲缘关系都较远，与烟草天蛾（Manduca sexta）类免疫球蛋白氨基酸序列相似度最高，为53%。荧光定量检测结果表明，茶尺蠖核型多角体病毒（EoNPV）感染茶尺蠖幼虫后该基因表达量显著升高，最高表达量是正常对照的36.5倍，表明茶尺蠖EoHML基因可能参与了茶尺蠖对EoNPV的免疫代谢反应。