原代人气道基底细胞的分离与培养

• 作者: 张文平 刘姿 贾建超 魏立 张晓菊
• 来源期刊: 河南大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 人原代气道基底细胞 健康捐赠者 肺部疾病
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 29-34
• 页数: 6页
• 分类号: R329.24
• 语种: 中文

摘要

目的:构建成熟的原代人气道基底细胞的分离、培养与传代体系.方法:从废弃的供肺或切除的病肺中分离出气管或较大的支气管;采用蛋白酶、DNA酶消化,搔刮气管或支气管内膜分离基底细胞,接种于Purecol包被的培养瓶,EpiX Base培养基培养、传代;免疫荧光染色法鉴定TRP63+KRT5+基底细胞;比较健康捐赠者和病肺来源的原代气道基底细胞活性.结果:成功分离培养38株人原代人气道基底细胞.标本来源宿主中男性21名、女性17名,年龄中位数59岁(2,77).其中健康捐献者12例,慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者11例,特发性肺纤维化(IPF)患者9例,系统性硬化肺纤维化3例,朗罕氏细胞增生症1例,尘肺病1例,特发性肺高压1例.人气道基底细胞镜下呈多边形,成片连接,形似蜂巢,细胞间连接紧密.成熟细胞形态较均一,细胞核大,胞浆内可见颗粒.免疫荧光染色证实为TRP63+KRT5+基底细胞.38株人气道基底细胞第1代细胞活性为81.25％±0.12％.健康捐献者来源(12例)与病肺来源(26例)的细胞株活性无明显统计学差异.结论:本研究中,分离和培养人气道基底细胞成功率高,细胞纯度高,细胞活性也较高,为人气道基底细胞体外试验提供了技术基础.健康捐献者来源与病肺来源的第1代细胞活性无明显统计学差异.