成纤维细胞的自噬性溶解死亡在增生性瘢痕消退过程中的作用

• 作者: 张剑 宋菲 王西樵
• 来源期刊: 上海交通大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 增生性瘢痕 成纤维细胞 自噬 细胞凋亡 自噬性溶解死亡 微管相关蛋白轻链-3 (LC3)
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究|Basic research
• 页码范围: 44-50
• 页数: 7页
• 分类号: R644
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2022.01.007

摘要

目的 ·探索增生性瘢痕消退成熟过程中,成纤维细胞是否发生自噬性溶解死亡.方法 ·收集上海交通大学医学院附属瑞金医院烧伤科2018年6月-2019年6月烧伤患者16例的瘢痕组织,分为增生组(对照组,8例)和消退组(试验组,8例)2组.采用透射电镜观察细胞组织内的自噬情况.体外分别培养2组患者的成纤维细胞.建立缺氧模型,分别于12、24、48 h时点收集细胞,采用透射电镜观察成纤维细胞的自噬情况.Calcein/PI荧光染料试剂盒检测活/死细胞的数量.免疫荧光显微镜下观察细胞的自噬和凋亡.流式细胞仪检测细胞凋亡和自噬性溶解死亡的数量.Western blotting观察低氧诱导因子-1 (hypoxia inducible factor 1,HIF-1)、自噬蛋白区域衍生肽beclin-1、微管相关蛋白轻链-3(microtuble-associated protein light chain 3,LC3)、半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、半胱氨酸蛋白酶-9的表达变化.2组间定量资料采用Student's t检验,多组间定量资料的分析使用One-way ANOVA检验.结果 ·电镜显示增生性瘢痕中存在自噬小体,退行性瘢痕中存在自噬性溶解死亡.体外培养细胞电镜观察结果与体内细胞的结果一致.死亡细胞在24 h显著增加,在48 h进一步增加.其中,细胞死亡类型主要为自噬性溶解死亡,少量凋亡.这与LC3的高表达有关.结论 ·增生性瘢痕演变过程中,除了细胞凋亡以外,自噬性溶解死亡可能是引起瘢痕消退成熟的主要方式,其中LC3作用明显.