MiR-381通过靶向基质细胞衍生因子-1对多发性肌炎组织浸润的巨噬细胞的作用机制

• 作者: 陈昭英 洪文轲
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 医学
• 关键词: 多发性肌炎 基质细胞衍生因子-1 巨噬细胞浸润 免疫组织化学 双荧光素酶报告基因实验 小鼠
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 所属期刊栏目: 细胞和分子生物学|Cell and Molecular Biology
• 页码范围: 183-189
• 页数: 7页
• 分类号: R632.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2022.02.007

摘要

目的 探讨miR-381通过靶向基质细胞衍生因子-1(SDF-1)对多发性肌炎(PM)组织浸润的巨噬细胞的作用机制.方法 通过兔肌球蛋白(1.5mg)、结核分枝杆菌(5mg)和百日咳毒素(500 ng)构建PM小鼠模型.将30只PM模型小鼠随机分为PM组和PM+miR-381组(每组15只),另取同期15只健康小鼠作为对照组.PM+miR-381组小鼠腹腔内注射miR-381 agomir(300 μg)2周.检测和比较各组小鼠血清中血清肌酸激酶(s-CK)、白细胞介素(IL)-1β和IL-6水平及肌肉组织病理学变化.通过免疫组织化学染色检测巨噬细胞标志蛋白F4/80,评估组织中浸润的巨噬细胞情况,检测各组肌肉组织中miR-381、SDF-1 mRNA和蛋白表达水平.通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-381和SDF-1的靶向关系.将小鼠巨噬细胞分为miR-381 NC组和miR-381 mimics组,通过转染 miR-381 mimics 过表达 miR-381,通过 Real-time PCR 和 Western blotting 检测各组 SDF-1 mRNA 和蛋白水平,通过Transwell实验检测细胞迁移水平评估侵袭能力.结果 动物实验上述指标3组间差异显著(P＜0.05).PM组肌肉组织中miR-381水平显著低于对照组,s-CK、IL-1β、IL-6、组织学评分、组织中浸润的巨噬细胞情况、SDF-1 mRNA和蛋白表达水平显著高于对照组(P＜0.05).PM+miR-381组肌肉组织中miR-381水平显著高于PM组,s-CK、IL-1β、IL-6、组织学评分、组织中浸润的巨噬细胞情况、SDF-1 mRNA和蛋白表达水平显著低于PM组(P＜0.05).双荧光素酶报告基因实验结果表明,miR-381可以与SDF-1靶向结合.细胞实验结果表明,miR-381 mimics组巨噬细胞中的SDF-1 mRNA和蛋白表达水平显著低于miR-381 NC组(P＜0.05).MiR-381 mimics组的迁移细胞数目显著低于miR-381 NC组(P＜0.05).结论 提高miR-381水平可通过靶向抑制SDF-1的表达而抑制巨噬细胞的炎性浸润能力,从而缓解PM.