miR-191靶向调控SATB1对肝癌细胞增殖和侵袭的影响

• 作者: 陈红英 高贵峰 闫少茹 王春艳 王长友
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 肝癌 微小RNA-191 特异AT序列结合蛋白1 细胞增殖 细胞侵袭
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 39-43
• 页数: 5页
• 分类号: R735.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2022.01.009

摘要

目的 探讨微小RNA-191(miR-191)靶向调控特异AT序列结合蛋白1(SATB1)对肝癌细胞增殖和侵袭的影响.方法 体外传代培养人肝癌细胞系HepG2、人肝正常细胞系L02(以下分别称HepG2、L02细胞).采用RT-PCR技术检测两种细胞miR-191、SATB1 mRNA表达,采用Western blotting法检测两种细胞SATB1蛋白表达.借助在线生物信息学软件starBase和TargetScan7.2预测miR-191与SATB1的结合位点,通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-191与SATB1的靶向调控关系.取HepG2细胞,随机分为对照组、SATB1组、miR-191 mimic组、SATB1+miR-191 mimic组,对照组转染阴性对照质粒,SATB1组转染SATB1过表达质粒,miR-191 mimic组转染miR-191 mimic,SATB1+miR-191 mimic组转染SATB1过表达质粒和miR-191 mimic.收集各组细胞,采用MTT法检测细胞增殖能力,采用Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力,采用Western blotting法检测增殖相关蛋白Cyclin D1、p27及上皮间质转化相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin表达.结果 HepG2细胞miR-191相对表达量低于L02细胞,而SATB1 mRNA和蛋白相对表达量均高于L02细胞(P均<0.01).经在线生物信息学软件starBase和TargetScan7.2预测和双荧光素酶报告基因实验验证,miR-191与SATB1存在靶向调控关系.培养72 h,miR-191 mimic组细胞增殖、侵袭能力均低于对照组和SATB1组(P均<0.05);而SATB1+miR-191 mimic组细胞增殖、侵袭能力均高于miR-191 mimic组(P均<0.05).与对照组和SATB1组比较,miR-191 mimic组Vimentin、N-cadherin、Cyclin D1蛋白相对表达量明显降低,E-cadherin、p27蛋白相对表达量明显升高(P均<0.05);与miR-191 mimic组比较,SATB1+miR-191 mimic组Vimentin、N-cadherin、Cyclin D1蛋白相对表达量明显升高,E-cadherin、p27蛋白相对表达量明显降低(P均<0.05).结论 miR-191通过靶向负调控SATB1抑制肝癌细胞增殖和侵袭,其机制可能与调控增殖相关蛋白Cyclin D1、p27及上皮间质转化相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin表达有关.