灰黄青霉D-756实时荧光定量PCR体系的建立及验证

• 作者: 严莉洪 石烨祺 吴君 畅瑛 施碧红
• 来源期刊: 福建农业科技
• 学科: 生物学
• 关键词: 灰黄青霉 灰黄霉素 荧光定量PCR 内参基因 聚酮合酶
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 微生物科学|Microbiology science
• 页码范围: 6-11
• 页数: 6页
• 分类号: Q933|Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.13651/j.cnki.fjnykj.2022.01.002

摘要

灰黄青霉D-756是1株灰黄霉素高产突变菌株,从转录水平揭示其灰黄霉素合成关键基因的表达情况,有助于了解其基因功能进而对菌株进行定向遗传改造.利用Primer3和Primer-BLAST设计引物,经qPCR验证,引物的扩增产物单一且扩增效率在90％ ～110％ 范围内,通过geNorm软件对TUBB、HISH3、RPS24和28S rRNA 4个候选内参基因的表达稳定性进行评价,选择评价结果中较为稳定的候选基因T UBB和R PS24作为内参基因,构建了一个适用于灰黄青霉D-756的qPCR体系.并用该体系检测灰黄青霉D-756中灰黄霉素合成关键基因gs f A在不同培养时间下的相对表达情况,为下一步研究灰黄霉素合成基因簇中各基因功能提供一个有力的工具.