缺氧下调血小板表面Siglec-9聚糖配体导致血小板功能异常活化

• 作者: 摄渊婷 曾东风 刘红梅 吴妮婷 贾乙
• 来源期刊: 陆军军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 缺氧 血小板 Siglec-9 聚糖配体 神经氨酸酶-1
• 年，卷（期）: 2022,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学|Basic Medicine
• 页码范围: 541-548
• 页数: 8页
• 分类号: R331.143|R363.21|R364.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.16016/j.2097-0927.202111025

摘要

目的 探讨血小板表面Siglec-9聚糖配体表达水平在缺氧条件下的变化及其对血小板活化功能的影响.方法 鉴定血小板表面表达的Siglec-9/E聚糖配体,并加入唾液酸酶处理血小板,分为对照组和唾液酸酶组;对24只6～8周龄雄性C57BL/6小鼠和血小板进行缺氧处理,分为对照3 d组、缺氧3 d组、对照7 d组和缺氧7 d组(n=6);将健康志愿者全血分离提取血小板放置于缺氧箱,分为对照组、缺氧48 h组、唾液酸神经节甘脂(Ganglioside GT1b,GT1b)组和奥司他韦组(n=3).采用流式细胞术检测血小板上Siglec-9/E配体、神经氨酸酶1(Neuraminidase-1)等表达,以及二磷酸腺苷(ADP)、胶原和凝血酶刺激后血小板活化标记物CD62p的表达水平;利用髓系细胞条件性6只6～8周龄雄性Siglec-E基因敲除小鼠(Lyz2-cre:Siglec-Eflox/flox)血小板验证Siglec-E对血小板活化的抑制作用.结果 相对分子质量约为130×103的Siglec-9/E配体在血小板表面广泛表达且具有唾液酸末端的聚糖结构;与对照7 d组相比,缺氧7 d组小鼠外周血血小板上该配体表达显著降低18.03％(P＜0.05),CD62p表达在ADP、胶原和凝血酶刺激下显著增高(P＜0.01),缺氧48 h组培养的血小板上该聚糖配体出现了相同改变(P＜0.01);与野生型比较,敲基因小鼠血小板在ADP、胶原和凝血酶刺激下CD62p水平显著增高(P＜0.01);Siglec-9/E特异性配体GT1b处理能够逆转缺氧导致的血小板异常活化(P＜0.05);神经氨酸酶抑制剂能够阻断缺氧导致的Siglec-9配体表达降低(P＜0.05).结论 缺氧激活NEU1降低Siglec-9/E聚糖配体表达,减弱了 Siglec-9/E途径抑制血小板活化的能力,导致血小板功能异常活化.