人参皂苷Rb1促进小鼠坐骨神经损伤修复的作用及机制

• 作者: 姚远 杜静怡 周文娟
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 医学
• 关键词: 坐骨神经损伤 人参皂苷Rb1 轴突再生 髓鞘再生 施万细胞 实时定量聚合酶链反应 免疫印迹法 小鼠
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 神经生物学|Neurobiology
• 页码范围: 19-27
• 页数: 9页
• 分类号: R361.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2022.01.003

摘要

目的 构建小鼠坐骨神经损伤(SNI)模型,探讨人参皂苷Rb1对小鼠坐骨神经损伤修复的促进作用及机制.方法 选取成年雄性昆明小鼠78只,随机分为假手术组(26只)、模型组(26只)、治疗组(26只).模型制作采用钳夹损伤法,假手术组仅游离坐骨神经.模型制作后30 min,治疗组腹腔注射10 mg/kg人参皂苷Rb1,模型组与假手术组给予同等体积的生理盐水.采用坐骨神经功能指数(SFI)对小鼠坐骨神经功能进行追踪评价;利用HE染色及生长相关蛋白43 (GAP43)免疫荧光染色检测损伤14 d后坐骨神经再生修复情况;利用透射电子显微镜观察损伤节段髓鞘的结构改变.损伤后14 d,检测脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF) mRNA水平的表达变化.模型制作后3d、7d,利用Ki67、S100β免疫荧光染色检测施万细胞的增殖、迁移能力;利用Real-time PCR检测炎症相关因子以及施万细胞激活相关转录因子mRNA表达水平;通过Western blotting对Sox10在蛋白水平的变化进行验证.结果 治疗组SFI评分高于模型组小鼠,神经近端、远端HE染色较均一.透射电子显微镜提示,治疗组髓鞘结构、厚度较模型组明显改善,髓鞘内神经纤维排列较为整齐.免疫荧光染色结果显示,治疗组坐骨神经GAP43+轴突伸长明显优于模型组,BDNF、NGF等营养因子表达升高.进一步检测发现,给予Rb1后损伤节段附近Ki67+细胞增殖、S100β+施万细胞迁移明显增多.Real-time PCR结果显示,治疗组肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β mRNA表达水平明显下降,施万细胞激活相关转录因子表达水平上升.结论 10 mg/kg Rb1能降低再生组织环境中炎症因子表达水平,增加BDNF、NGF等营养因子的表达水平,促进施万细胞激活,从而促进小鼠坐骨神经损伤后的神经再生.