不同浓度丁酸钠抑制氧化型低密度脂蛋白诱导THP-1细胞炎症反应的研究

• 作者: 丁龙坤 席月 闫曼 杨大凯 周林 吴亮
• 来源期刊: 新疆医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 巨噬细胞 丁酸盐 氧化型低密度脂蛋白 自噬 炎症反应
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究|Basic Medicine Research
• 页码范围: 29-36
• 页数: 8页
• 分类号: R734
• 语种: 中文
• DOI: 10.3639/j.issn.1009-5551.2022.01.006

摘要

目的 探讨不同浓度的丁酸钠抑制氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱发人单核巨噬THP-1细胞炎症反应能力及其机制.方法 分别使用终浓度为50、100、200、400、800μmol/L的丁酸钠预处理THP-1细胞24 h,再以终浓度为50 mg/L的Ox-LDL刺激THP-1细胞24 h,采用实时荧光定量PCR法和ELISA法检测IL-1β、TNF-α、IL-10和TGF-β表达量,实时荧光定量PCR法和免疫印迹法检测NLRP3和Caspase-1的表达量,免疫印迹法检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和Beclin-1的表达量,以及NF-κB p65在细胞核和胞浆中的分布情况.本研究同时设置正常对照组和无丁酸钠预处理的Ox-LDL组.结果 与Ox-LDL组比较,分别经终浓度为200、400、800μmol/L丁酸钠预孵育后,THP-1细胞IL-10和TGF-β表达量显著升高(P<0.01);50、100、200、400μmol/L丁酸钠预处理组细胞TNF-α表达量明显下降(P<0.01);50和100μmol/L丁酸钠预处理组细胞IL-1β表达量明显下降(P<0.01);50、100、200、400、800μmol/L丁酸钠预处理组细胞Caspase-1表达量明显下降(P<0.01);仅400和800μmol/L丁酸钠预处理组细胞NLRP3蛋白表达量明显下降(P<0.01),其他浓度丁酸钠抑制效果不明显.Ox-LDL刺激后THP-1细胞NF-κB p65蛋白明显由细胞浆移位至细胞核内(P<0.01),而经50、100、200、400、800μmol/L丁酸钠预处理后,NF-κB p65蛋白核转位现象明显受到抑制(P<0.01).与Ox-LDL组比较,200、400、800μmol/L丁酸钠可以显著上调THP-1细胞Beclin-1表达量(P<0.01),50、100、200、400、800μmol/L丁酸钠可以显著上调LC3-Ⅱ表达量(P<0.01).结论 丁酸钠可以抑制由Ox-LDL诱发的THP-1细胞炎症反应,其可能的机制是通过上调THP-1细胞自噬水平,抑制THP-1细胞NF-κB信号通路和NLRP3炎症复合体活化而产生抗炎效果.本结果为采用"肠道微生物组-免疫炎症轴"理论干预高血脂患者体内慢性非可控性炎症提供了实验依据.