杀鲑气单胞菌可视化重组酶聚合酶扩增检测技术的建立

• 作者: 谷庆花 李铭远 司鑫鑫 高嵩
• 来源期刊: 淡水渔业
• 学科: 农学
• 关键词: 杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida) 重组酶聚合酶扩增 侧向流试纸条 现场检测
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 页码范围: 52-57
• 页数: 6页
• 分类号: S941.42
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-6907.2022.01.007

摘要

本研究根据杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)的铁载受体(fstA)基因的保守序列设计特异性引物和探针,建立了一种基于重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)与侧向流试纸条(lateral flow strips,LFS)相结合的可视化快速检测杀鲑气单胞菌的方法.结果显示:本研究建立的基于RPA-LFS的杀鲑气单胞菌检测方法在37℃孵育25 min即可完成,特异性良好,与其他致病菌无交叉反应;灵敏度实验结果显示,该菌的纯培养物和人工污染的鲤鱼组织中的最低检测限均为单次反应1 CFU(colony forming unit).本研究建立的基于RPA-LFS的杀鲑气单胞菌检测方法具有特异、灵敏、快速等优点,检测结果可通过肉眼直接观察,操作简单,不依赖昂贵的仪器设备,适用于养殖业中杀鲑气单胞菌的现场检测.