小熊猫粪便中纤维素降解菌株的筛选、基因改造及生物合成聚羟基丁酸酯条件的优化

• 作者: 刘童童 卢晨曦 原楚妍 陈怡 吴弘
• 来源期刊: 天津师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 小熊猫粪便 纤维素降解菌 枯草芽孢杆菌 基因改造 生物合成 聚羟基丁酸酯
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 生命科学|Life Sciences
• 页码范围: 45-50
• 页数: 6页
• 分类号: Q935|Q939.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.19638/j.issn1671-1114.20220108

摘要

为了发掘能够利用纤维素生产聚羟基丁酸酯(PHB)的菌种并获得最佳的发酵条件,用刚果红染色法从小熊猫粪便中筛选出具有纤维素降解能力的菌株,利用基因工程技术,将其改造为PHB生产菌株,利用响应面法,确定菌株发酵合成PHB的最优条件.经过透明圈检测和纤维素酶活力测定,分离获得1株可高效降解纤维素的细菌,结合形态学观察、生理生化特征和16S rDNA序列测定,确定该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis).以来自罗氏真养菌(Ralstonia eutropha)的基因为模板,将PHB合成途径中的基因phaA、phaB和phaC转入到菌株中,得到重组菌株Bacillus subtilis-N8(3hb),该基因重组菌株可利用玉米秸秆生产PHB.利用响应面法确定合成PHB的最优条件:发酵温度为37.09℃,培养起始pH值为7.08,摇床转速为144.72 r/min.在此条件下,PHB产量最高,可达到15.98 g/L.