WAS-like蛋白在肠癌组织中低表达并抑制人结肠癌细胞的干性

• 作者: 李宏丹 杨成
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 医学
• 关键词: WASL-like蛋白 肠癌 干性 缺氧 耐药 免疫印迹法 人
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 肿瘤生物学|Cancer Biology
• 页码范围: 50-59
• 页数: 10页
• 分类号: R735.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2022.01.007

摘要

目的 探讨WAS-like蛋白(WASL)在肠癌的表达情况,以及对肠癌细胞干性的影响.方法 运用UALCAN数据库预测WASL蛋白的表达量与肠癌组织中的表达及其与肠癌患者的性别、临床分期、淋巴结转移的关系;组织免疫荧光和细胞免疫荧光染色验证WASL在肠癌组织和细胞中的表达.Western blotting检测人正常结直肠黏膜细胞(FHC细胞)与肠癌细胞HCT-116和SW-480中WASL蛋白的表达情况及WASL的转染效率;应用干细胞球(sphere)形成实验和集落形成实验检测转染后,WASL对肠癌细胞中癌干细胞(CSCs)的影响;Real-time PCR检测CSCs相关基因八聚体结合转录因子4(OCT4),性别决定区Y框蛋白2(SOX2),Lin28,Krüppel样因子(KLF)的表达;采用缺氧,血清剥夺和对5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药实验检测WASL对肠癌细胞干性的影响.结果 WASL在肠癌组织中mRNA和蛋白均低表达(P＜0.05);WASL在肠癌组织中低表达,在HCT-116和SW-480中,WASL的表达明显弱于FHC细胞;成功构建稳定WASL表达的肠癌细胞系;Real-time PCR显示,WASL抑制了CDCs相关基因OCT4,SOX2,Lin28,Krüppel样因子(KLF)的表达;干细胞球形成和集落形成实验发现,WASL抑制肠癌细胞形成干细胞球形成和集落形成;缺氧实验和血清剥夺实验发现WASL上调后,能够抑制肠癌对缺氧和缺血清耐受,5-FU耐药实验显示,WASL也能抑制肠癌细胞对5-FU的耐受.结论 WASL蛋白在肠癌组织和肠癌细胞中低表达,并与肠癌的不良预后有关,WASL蛋白的过表达能够抑制肠癌细胞的干性.