P53凋亡刺激蛋白2促进肝细胞脂质蓄积的分子机制研究

• 作者: 车阳 王晋明 王阳 石英
• 来源期刊: 北京医学
• 关键词: P53凋亡刺激蛋白2 代谢相关脂肪性肝病 CYP4A
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 49-53
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.15932/j.0253-9713.2022.01.011

摘要

目的 研究P53凋亡刺激蛋白2(apoptosis stimulating protein of P53-2,ASPP2)在代谢相关脂肪性肝病(metabolic associated fatty liver disease,MAFLD)中对肝细胞脂质蓄积的分子机制.方法 利用ASPP2单倍体敲除小鼠(ASPP2+/-)和对照小鼠(ASPP2+/+)进行转录组差异分析,筛选差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),利用京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)数据库对DEGs进行富集和功能注释,基于相邻基因重复实例的搜索工具(search tool for recurring instances of neighbouring genes,STRING)数据库及 Cytoscape 软件分析相互作用关键基因.体外实验,培养正常小鼠肝细胞AML 12细胞系和人正常肝细胞系7702,分别在ASPP2过表达及敲除状态下构建MAFLD细胞模型.采用油红染色观察脂质蓄积情况,采用反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)分析mRNA差异表达情况.结果 共筛选出285个DEGs,包括147个上调基因和138个下调基因.基因本体(gene ontology,GO)功能富集显示,DEGs显著富集在脂质代谢过程、CYP450途径、脂质贮存调控和脂质生物合成过程负调控等;KEGG通路富集显示,DEGs显著富集在花生四烯酸代谢、PPAR信号通路和TRP通道的炎症介质调节等.蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络筛选出CYP4A 15个关键基因.体外结果显示,ASPP2过表达时脂质蓄积加重,CYP4A及炎症因子mRNA增加(P＜0.001);ASPP2敲除时,CYP4A及炎症因子mRNA减少(P＜0.01).结论 ASPP2可促进肝细胞脂质蓄积,从而加快MAFLD的进展.