黄颡鱼STAT3乙酰化位点验证及其与SIRTs去乙酰化酶的关系

• 作者: 郑华 徐一闯 赵涛 吕武宏 余岸艮 何杨 谭肖英
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 黄颡鱼 STAT3 乙酰化 SIRTs 过表达
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 页码范围: 173-182
• 页数: 10页
• 分类号: Q785|S917.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20201212556

摘要

为研究黄颡鱼STAT3乙酰化位点及其与SIRTs去乙酰化酶家族之间的关系,实验首先构建带Flag标签的STAT3过表达质粒及带HA、GFP标签的SIRTs过表达质粒,并对STAT3可能发生乙酰化的位点进行突变体构建;其次,转染STAT3及突变体和STAT3、SIRTs共转染于HEK293T细胞,利用免疫印迹、免疫沉淀和免疫荧光等技术进行检测.结果显示,STAT3是一种胞浆蛋白.与野生型STAT3相比,突变体K685R的乙酰化水平显著降低.突变体K49R、K87R、K680R、K712R和K714R的乙酰化水平与野生型STAT3无显著差异,表明K685是STAT3的关键乙酰化位点.免疫沉淀和免疫荧光结果显示,SIRT2、SIRT7与STAT3发生蛋白互作并催化STAT3的去乙酰化,而SIRT5不与STAT3发生蛋白互作,对其乙酰化水平无明显影响.本研究揭示了黄颡鱼STAT3的乙酰化位点及STAT3和SIRTs之间的关系,为探讨STAT3蛋白乙酰化修饰在鱼类生理功能中的作用奠定基础.