头花蓼对幽门螺杆菌刺激骨髓来源巨噬细胞炎症反应的作用及机制

• 作者: 袁蕴馨 简单 张姝 何芸 孙朝琴 黄健 莫非
• 来源期刊: 贵州医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 螺杆菌 幽门 核因子κB受体活化因子 白细胞介素-1β 头花蓼 骨髓来源巨噬细胞 NOD样受体蛋白3 核因子-κB单体p65
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 13-19
• 页数: 7页
• 分类号: R285.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.19367/j.cnki.2096-8388.2022.01.003

摘要

目的 探讨头花蓼(PC)对幽门螺杆菌(H.pylori)刺激骨髓来源巨噬细胞(BMDMs)炎症反应的作用及机制.方法 室温复苏H.pylori SS2000菌株,培养48 h并鉴定,将H.pylori与BMDMs共孵育,按照不同感染复数(MOI,细菌数:细胞数)分为空白、25:1、50:1、100:1、200:1及400:1组,并培养48 h,采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测各组BMDMs细胞活力;并于3、6、12及24 h收集细胞及上清,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测不同MOI及刺激时间下白细胞介素-1β(IL-1β)IL-18的含量;取BMDMs分为空白组[不加H.pylori,加改良依格尔(DMEM)培养液]、模型组(加H.pylori,DMEM培养液)及PC治疗组(加H.pylori,DMEM培养液,0.08μg/L PC),采用Western blot检测各组BMDMs细胞质与细胞核中核因子κB单体p65(NF-κB/p65)的表达及细胞裂解液中NOD样受体蛋白3(NLRP3)、IL-1β前体(Pro-IL-1β)及细胞上清液中IL-1β蛋白的表达.结果 MOI高于100:1时,细胞抑制率增高,BMDMs的数量减少(P<0.05);模型组BMDMs多数变圆,表面不光滑,颗粒物质明显增多;MOI为100:1且作用12 h时,BMDMs中IL-1β及IL-18含量达到最高;模型组BMDMs细胞质内NF-κB/p65蛋白表达较空白组减少、细胞核内NF-κB/p65蛋白表达较空白组升高(P<0.05),PC治疗组BMDMs胞内NF-κB/p65蛋白表达较模型组升高、核内NF-κB/p65蛋白表达较模型组减少(P<0.05);模型组BMDMs中NLRP3、IL-1β蛋白表达较空白组升高(P<0.05),PC治疗组BMDMs中NLRP3、IL-1β蛋白表达较模型组减少(P<0.05);各组BMDMs中Pro-IL-1β 蛋白表达比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 PC可改善H.pylori引起的BMDMs细胞炎症反应,其机制可能与抑制NF-κB/NLRP3/IL-1β信号通路的激活有关.