蚓激酶同工酶降解乙型肝炎抗原并保护肝功能

• 作者: 周园 牟丽娴 范士超 王秀梅 曹潇 王学清 张奉学 赵静 魏艳 赫荣乔
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 医学
• 关键词: HBeAg HBcAg HBsAg 蚓激酶同工酶 乙肝病毒 同工酶
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 药物研发|Drug R&D
• 页码范围: 202-218
• 页数: 17页
• 分类号: Q55|R511
• 语种: 中文
• DOI: 10.16476/j.pibb.2022.0003

摘要

目的 蚓激酶同工酶(LKIs)作为肠溶胶囊的有效成分,用于治疗血栓性疾病已有30多年历史.近年来,LKIs在其他危重疾病中的研究时有报道.本文关注LKIs在乙型肝炎方面的作用.方法 乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、核心抗原(HBcAg)和e抗原(HBeAg)分别与不同浓度LKIs孵育,观察这些蛋白质的降解和估计肽链的切割位点.HepG2.2.15细胞与LKIs孵育,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)和蛋白质印迹(Western blotting)检测细胞分泌的HBsAg和HbeAg.LKIs灌胃Balb/c小鼠30天,采用ELISA和Western blotting检测其血清HBsAg和HBeAg,免疫组化染色检测肝组织中的HBcAg.采用苏木精-伊红染色分析乙肝病毒转基因小鼠肝组织的损害,并通过ELISA定量分析血清谷草转氨酶(GOT)和谷丙转氨酶(GPT).腹腔注射后,取大鼠血清和肝组织,测定其中的LKIs含量,从而观察LKIs的吸收.采用LKIs给龙岩麻鸭灌胃30天,通过PCR检测其血清HBV DNA.结果 蚓激酶肠溶胶囊的有效成分是含有6种LKIs的复方蛋白酶药物,可以降解HBV编码的蛋白质.LKIs降解HBsAg的位点为K141/P142及R160/F161;HBcAg为R142/E143;HBeAg为R122/E123.LKIs可显著抑制HepG2.2.15细胞分泌HBsAg和naeAg.LKIs灌胃,HBV转基因小鼠血清HBsAg和HBeAg水平及肝组织的HBcAg水平均降低,提示病毒的组装和释放可能受到了抑制.在LKIs处理的转基因小鼠中,血清GPT和GOT水平降低,肝组织溶解数量减少,表明LKIs对小鼠肝细胞具有保护作用.LKIs灌胃龙岩麻鸭,血清中DHBV DNA水平明显下降,停药后出现反弹.结论 LKIs通过降解HBs、HBc和HBe蛋白,可能干扰HBV的装配和释放,减少病毒在肝细胞之间的传递,从而对肝细胞起到保护作用.