N-乙酰半胱氨酸对尼古丁诱导的MC3T3-E1细胞凋亡的作用及其机制

• 作者: 崔磊华 侯玉帛 苏畅 李明贺 聂鑫
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: MC3T3-E1细胞 尼古丁 N-乙酰半胱氨酸 细胞凋亡 氧化应激
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究|Research in basic medicine
• 页码范围: 26-32
• 页数: 7页
• 分类号: Q25|Q813
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671‑587X.20220104

摘要

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对尼古丁诱导的小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1细胞凋亡的影响,并阐明其作用机制.方法:体外培养MC3T3-E1细胞,采用不同浓度(0、1.0、2.5、5.0和7.5 mmol·L-1)尼古丁诱导MC3T3-E1细胞损伤,采用MTT法检测各组MC3T3-E1细胞增殖活性,并确定尼古丁半数抑制浓度(IC50).根据IC50值将MC3T3-E1细胞分为对照组、尼古丁组和尼古丁+不同浓度(2.5、5.0和7.5 mmol·L-1)NAC组,采用MTT法检测各组细胞增殖活性,以确定NAC最适作用浓度.将细胞分为对照组、尼古丁(4.25 mmol·L-1)组、NAC(5.0 mmol·L-1)组和尼古丁(4.25 mmol·L-1)+NAC(5.0 mmol·L-1)组,采用MitoSOX荧光染色法检测各组细胞中线粒体来源活性氧簇(mitoROS)水平,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平,并计算Bax/Bcl-2比值.结果:与0 mmol·L-1尼古丁组比较,不同浓度尼古丁组细胞增殖活性明显降低(P<0.05),且呈浓度依赖性.尼古丁的IC50值为(4.25±0.03)mmol·L-1.与对照组比较,尼古丁组细胞增殖活性明显降低(P<0.05);与尼古丁组比较,尼古丁+不同浓度NAC组细胞增殖活性明显升高(P<0.05),尼古丁+5.0 mmol·L-1 NAC组细胞增殖活性升高最明显.与对照组比较,尼古丁组细胞中mitoROS水平明显升高(P<0.05),细胞凋亡率明显升高(P<0.05),细胞中Bax/Bcl-2比值明显升高(P<0.05);与尼古丁组比较,NAC组和尼古丁+NAC组细胞中mitoROS水平明显降低(P<0.05),细胞凋亡率明显降低(P<0.05),尼古丁+NAC组细胞中Bax/Bcl-2比值明显降低(P<0.05).结论:NAC可缓解尼古丁诱导的MC3T3-E1细胞凋亡,其作用机制可能与线粒体氧化应激有关.