草莓FaABI5基因的克隆与表达分析

• 作者: 李佳乐 邓丽丽 徐世琼 程宇星 刘勇强 汤浩茹
• 来源期刊: 北方园艺
• 学科: 农学
• 关键词: 草莓 FaABI5基因 克隆 表达特性
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文|Research Papers
• 页码范围: 31-39
• 页数: 9页
• 分类号: S668.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.11937/bfyy.20212123

摘要

以'红颜'草莓为试材,采用同源克隆方法得到FaABI5基因,利用荧光定量PCR法获取该基因的表达模式,通过转录活性验证和亚细胞定位分析其蛋白的特性,利用大肠杆菌诱导表达该蛋白,以期为进一步解析FaABI5的基因功能提供参考依据.结果 表明:草莓FaABI5基因的开放阅读框为1329 bp,共编码442个氨基酸,预测分子量约为47.1 kDa,理论等电点为9.70,属于不稳定亲水蛋白.氨基酸序列比对显示该基因与其它物种的ABI5蛋白具有较高一致性,系统发育树表明草莓FaABI5与森林草莓、月季中的同源蛋白聚为一支,亲缘关系较近.获得该基因起始密码子上游1500 bp长的启动子序列,分析显示除了有大量ABA响应元件ABRE外,还存在许多光、植物激素及非生物胁迫响应元件.qRT-PCR结果表明,FaABI5在草莓的根和茎中表达量最高,在果实中表达量较低.在酵母中,FaABI5不具有转录激活能力.亚细胞定位试验证明FaABI5为核定位蛋白.在大肠杆菌Rosetta(DE3)中,28℃自诱导24 h可以获得具有生物活性的FaABI5重组蛋白.