脑膜瘤组织中MGMT甲基化状态及其对脑膜瘤细胞生长与转移的影响

• 作者: 胡德献 孙衍昶 冯基高 莫业和
• 来源期刊: 中国医师杂志
• 关键词: 脑膜瘤 O(6)-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶 甲基化 细胞增殖 细胞迁移
• 年，卷（期）: 2022,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 377-382
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn431274-20210412-00413

摘要

目的:探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)在脑膜瘤组织中的甲基化状态及其对人脑膜瘤细胞系IOMM-Lee细胞生长和转移的作用。方法:收集本院34例脑膜瘤患者的标本，甲基化特异的PCR(MSP)法检测脑膜瘤组织和正常脑组织中MGMT甲基化水平，免疫组织化学染色检测脑膜瘤组织和正常脑组织中MGMT表达。将培养的人胶质瘤细胞系IOMM-Lee细胞分为空白对照组(正常培养的IOMM-Lee细胞)、阴性对照组(空载体病毒转染IOMM-Lee细胞)和RNAi慢病毒转染组(转染RNAi慢病毒载体下调MGMT表达的IOMM-Lee细胞)，通过RNAi技术沉默IOMM-Lee细胞中MGMT的表达，实时荧光定量PCR和Western blot检测细胞中MGMT mRNA与蛋白表达水平，CCK-8实验检测细胞增殖活性，细胞克隆形成实验检测细胞克隆形成能力，Transwell实验和细胞划痕实验分别检测各组细胞侵袭与迁移能力。结果:脑膜瘤组织中MGMT甲基化达到88.23%(30/34)，正常脑组织中未检测到MGMT甲基化；脑膜瘤组织中MGMT染色强度较正常脑组织明显增加。与空白对照组和阴性对照组比较，RNAi慢病毒转染组IOMM-Lee细胞中MGMT mRNA和蛋白相对表达量均显著下降(均 P<0.05)，转染24、48和72 h后IOMM-Lee细胞增殖活性显著下降(均 P<0.05)，细胞克隆形成数目、细胞侵袭数目显著下降(均 P<0.05)，同时，细胞划痕愈合率显著降低( P<0.05)。 结论:MGMT在人脑膜瘤组织中多呈高甲基化，沉默脑膜瘤细胞中MGMT表达可抑制脑膜瘤细胞生长与转移。