基于NF-κB/MAPK信号通路miR-125a-5p诱导乳腺癌MCF7细胞自噬的作用机制研究

• 作者: 郭建美 杨颖博 李杰
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 乳腺肿瘤 自噬 微小RNA-125a-5p 核因子-κB 有丝分裂原活化蛋白激酶 信号传导
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 论著·基础研究|Basic Research
• 页码范围: 20-24,28
• 页数: 6页
• 分类号: R737.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2022.01.005

摘要

目的 探讨微小RNA-125 a-5 p(miR-125 a-5 p)基于核因子-κB(NF-κB)/有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路诱导乳腺癌MCF7细胞自噬的作用机制.方法 取对数期生长乳腺癌MCF7细胞,分为miR-125 a-5 p组、miR-NC组和空白组,采用慢病毒转染法将hsa-miR-125 a-5 p mimics、NC-mimics分别转染至miR-125 a-5 p组和miR-NC组,空白组不给予处理.采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测转染后各组细胞miR-125a-5p基因相对表达水平;采用单丹磺酰二胺及Hoechst双染色检测各组细胞自噬情况,并采用Western blot法检测自噬相关蛋白Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3Ⅱ)表达情况;采用RT-qPCR、Western blot法检测各组细胞NF-κB/MAPK信号通路相关基因及蛋白相对表达水平.结果 空白组、miR-NC组、miR-125a-5p组miR-125a-5p基因相对表达水平分别为0.44±0.08、0.42±0.07、1.27±0.16,miR-125a-5p组miR-125a-5p基因相对表达水平高于空白组和miR-NC组,差异有统计学意义(P<0.05);空白组、miR-NC组、miR-125a-5p组细胞阳性率分别为(2.10±0.52)％、(2.30±0.47)％、(26.40±7.14)％,miR-125a-5p组细胞阳性率高于空白组和miR-NC组,差异有统计学意义(P<0.05);miR-125a-5p组自噬相关蛋白Beclin1、LC3Ⅱ蛋白相对表达水平高于空白组和miR-NC组,差异有统计学意义(P<0.05).3组NF-κB p65、细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)、MAPK p38 mRNA相对表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);miR-125a-5p组NF-κB/MAPK信号通路磷酸化蛋白与相应蛋白比值p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-ERK1/2/ERK1/2、p-MAPK p38/MAPK p38均高于空白组和miR-NC组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 过表达miR-125 a-5 p基因可诱导乳腺癌MCF7细胞发生自噬,可能与NF-κB/MAPK信号通路激活有关.