H7N9亚型禽流感病毒血凝素蛋白在杆状病毒中的表达及其免疫效力评估

• 作者: 郭晓琴 张谞霄 马诚太 欧杰 李柏林 李鑫
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: H7N9亚型禽流感病毒 重组杆状病毒 血凝素 免疫原性
• 年，卷（期）: 2022,（1）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医?水产养殖|ANIMAL HUSBANDRY AND VETERINARY SCIENCES?AQUICULTURE
• 页码范围: 143-150
• 页数: 8页
• 分类号: S852.65+7
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2022.01.017

摘要

旨在利用杆状病毒表达系统构建1株对高致病性H7N9亚型禽流感病毒(A/Chicken/Huizhou/HZ-3/2016)攻击后的家禽提供保护的候选疫苗株.用同源重组的方法构建1株表达H7N9亚型禽流感病毒(A/chicken/Shaoxing/5201/2013株)血凝素(Hemagglutinin,HA)蛋白的重组杆状病毒.用PCR技术鉴定重组杆状病毒rBac-SX5201HA的遗传稳定性,用间接免疫荧光方法和Western Blotting方法鉴定HA蛋白的表达情况,用血凝试验检测HA蛋白的体外活性,继而对重组疫苗在无特定病原体(Specific pathogen free,SPF)鸡上进行免疫效力试验,并对免疫后21 d的SPF鸡血清进行抗体检测,对攻毒5 d后的鸡咽喉和泄殖腔棉拭子进行病毒分离.结果显示,重组杆状病毒rBac-SX5201HA在昆虫细胞中生长良好,且可稳定高效表达H7 HA蛋白,血凝效价可达26;重组疫苗免疫SPF鸡21 d后可诱导28.4血凝抑制(Hemagglutinin inhibition,HI)抗体效价并能抵抗高致病性H7N9亚型禽流感病毒的攻击,免疫组SPF鸡群均未发病或死亡,仅有17％的SPF鸡在攻毒后第5 d出现排毒.可以看出,重组疫苗对高致病性H7N9亚型禽流感病毒攻击后的SPF鸡提供了100％的保护,且可有效抑制病毒在SPF鸡体内的复制.