骨形态发生蛋白-7的过表达载体对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

• 作者: 黄生祥 梅海波 赫荣国 刘昆 唐进 伍海燕
• 来源期刊: 临床骨科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨形成蛋白 骨髓间充质干细胞 慢病毒转染 成骨分化
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 所属期刊栏目: 实验与临床|Experiment and Clinical Practice
• 页码范围: 292-295
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2|R336
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0287.2022.02.049

摘要

目的 探讨骨形态发生蛋白-7(BMP-7)的过表达载体对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的影响.方法 取10例健康志愿者的骨髓组织,培养原代BMSCs.采用流式细胞仪检测BMSCs的表面蛋白,对BM-SCs进行鉴定.利用基因编辑技术,构建BMP-7的过表达载体,通过慢病毒转染BMSCs,将BMSCs分成转染组和未转染组.反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测BMP-7以及成骨分化标志物碱性磷酸酶(ALP)、Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙素(OCN)的表达.并对两组细胞进行茜素红和ALP染色.结果 BMSCs中CD90和CD106的表达为60.2％和58.3％;CD33和CD45的表达为3.4％和2.6％.慢病毒转染BMSCs的转染滴度为3×108 TU/ml.RT-PCR结果:BMP-7以及成骨分化标志物ALP、Runx2和OCN的mRNA的相对表达量转染组要明显高于未转染组(P<0.05).茜素红染色结果:转染组肉眼可见明显红色染色区域,镜下可见大量钙结节点.ALP染色结果:转染组肉眼可见紫色染色区域,镜下可见ALP染色呈强阳性.结论 慢病毒转染BMP-7可以促进BMSCs成骨分化.