三角帆蚌kinase X基因的克隆及功能初探

• 作者: 崔晓羽 董赛赛 段胜华 汪桂玲 李家乐
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 三角帆蚌 kinase X基因 Sox9基因 基因克隆 表达分析 RNAi
• 年，卷（期）: 2022,（4）
• 页码范围: 537-545
• 页数: 9页
• 分类号: Q785|S966.22+1
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20201012453

摘要

三角帆蚌是我国特有的淡水育珠蚌,在养殖业中占有重要地位,在实际养殖过程中,雄性个体有着明显的产珠优势,因此对性别决定的相关研究至关重要.研究发现Sox9基因在许多物种中起到性别决定的作用,kinase X基因是蛋白激酶(PKA)合成中至关重要的基因,而Sox9基因很可能受到PKA激酶的调控.实验通过RACE法克隆kinase X基因的全长cDNA序列,使用荧光定量PCR的方法检测该基因在2龄雌雄三角帆蚌各组织中的相对表达量,利用RNA干扰技术研究干扰链对kinase X基因及下游基因Sox9基因表达的影响.结果显示,kinase X基因全长1652 bp,编码430个氨基酸;荧光定量PCR结果显示,kinase X基因在雄性性腺中表达量最高,雌雄间差异极显著;RNA干扰结果显示,合成的干扰链均对kinase X基因有着一定的干扰效率,其中干扰链1的干扰率最高,在雌性中的干扰率为83.1％,雄性中为81.9％,同时干扰链1干扰后Sox9基因的表达量在雌性中下降了90.3％,雄性中下降了56.6％,推测这两个基因可能参与性别决定过程.本实验为三角帆蚌性别决定和雄性单性化育种研究提供理论基础.